Meiyuan qian, yuefeng tan, bo xu
Aplika R & D -Centro
Enkonduko
Taxus (Taxus chinensis aŭ ĉina teksaĵo) estas sovaĝa planto protektita de la lando. Ĝi estas malofta kaj endanĝerigita planto postlasita de la kvaternaj glaĉeroj. Ĝi ankaŭ estas la sola natura kuraca planto en la mondo. Taxus estas distribuita en la temperita zono de la norda hemisfero al la meza subtropika regiono, kun ĉirkaŭ 11 specioj en la mondo. Estas 4 specioj kaj 1 vario en Ĉinio, nome Nordorienta Taxus, Yunnan Taxus, Taxus, Tibeta Taxus kaj Suda Taxus. Ĉi tiuj kvin specioj estas distribuitaj en sudokcidenta Ĉinio, Suda Ĉinio, Centra Ĉinio, Orienta Ĉinio, Nordokcidenta Ĉinio, Nordorienta Ĉinio kaj Tajvano. Taxus -plantoj enhavas ampleksan varion de kemiaj komponentoj, inkluzive de taksanoj, flavonoidoj, lignanoj, steroidoj, fenolaj acidoj, sesquiterpenoj kaj glicosidoj. La fama kontraŭtumora drog-taksolo (aŭ paclitaxel) estas speco de taksanoj. Taxol havas unikajn kontraŭkancerajn mekanismojn. Taxol povas "frostigi" mikrotubulojn kombini kun ili kaj malhelpi mikrotubulojn disigi kromosomojn en la momento de ĉela divido, tiel kaŭzante la morton de dividantaj ĉeloj, precipe rapide proliferi kancerajn ĉelojn [1]. Plue, per aktivigado de makrofagoj, Taxol kaŭzas malpliiĝon de TNF-α (tumora nekrosis-faktoro) riceviloj kaj liberigo de TNF-α, tiel mortigante aŭ malhelpante tumorajn ĉelojn [2]. Plie, Taxol povas indukti apoptozon per agado sur la apoptotika ricevilo -vojo mediata de Fas/FasL aŭ aktivigi la cisteinan proteazan sistemon [3]. Pro ĝia multobla cela kontraŭkancera efiko, Taxol estas vaste uzata en la kuracado de ovara kancero, mama kancero, ne-malgranda ĉela pulmkancero (NSCLC), gastrika kancero, ezofagia kancero, vezika kancero, prostata kancero, maligna melanomo, kapo kaj kolo-kancero, ktp [4]. Precipe por progresinta mama kancero kaj progresinta ovara kancero, Taxol havas elstaran kuracan efikon, tial ĝi estas konata kiel "la lasta linio de defendo por kancero -kuracado".
Taxol estas la plej populara kontraŭkancera drogo en la internacia merkato en la lastaj jaroj kaj estas konsiderata kiel unu el la plej efikaj kontraŭkanceraj drogoj por homoj en la venontaj 20 jaroj. En la lastaj jaroj, kun la eksploda kresko de loĝantaro kaj kancero -efiko, la postulo je taksolo ankaŭ pliiĝis signife. Nuntempe, taksolo bezonata por klinika aŭ scienca esplorado estas ĉefe ĉerpita rekte el Taxus. Bedaŭrinde, la enhavo de Taxol en plantoj estas sufiĉe malalta. Ekzemple, la Taxol -enhavo estas nur 0,069% en la ŝelo de Taxus brevifolia, kiu estas ĝenerale konsiderata kiel la plej alta enhavo. Por la eltiro de 1 g da Taxol, ĝi postulas ĉirkaŭ 13,6 kg da Taxus -ŝelo. Surbaze de ĉi tiu takso, necesas 3 - 12 Taxus -arboj, kiuj havas pli ol 100 jarojn por trakti ovarian kanceran pacienton. Rezulte, granda nombro da Taxus -arboj estis reduktita, rezultigante preskaŭ estingon por ĉi tiu altvalora specio. Krome, Taxus estas tre malriĉa en rimedoj kaj malrapida kresko, kio malfaciligas plian disvolviĝon kaj utiligon de Taxol.
Nuntempe la totala sintezo de Taxol estis sukcese finita. Tamen ĝia sinteza vojo estas tre kompleksa kaj altkosta, igante ĝin ne havi industrian gravecon. La duon-sinteza metodo de Taxol nun estas relative matura kaj estas konsiderata kiel efika maniero vastigi la fonton de Taxol aldone al artefarita plantado. Mallonge, en la duon-sintezo de Taxol, la Taxol-pionira komponaĵo, kiu estas relative abunda en Taxus-plantoj, estas ĉerpita kaj tiam konvertita al Taxol per kemia sintezo. La enhavo de 10-deacetilbaccatino ⅲ en la nadloj de Taxus baccata povas esti ĝis 0,1%. Kaj la nadloj estas facile regeneritaj komparante kun la bojoj. Tial la duon-sintezo de Taxol surbaze de 10-deacetilbaccatino ⅲ allogas pli kaj pli da atento de esploristoj [5] (kiel montrite en Figuro 1).
Figuro 1. La duon-sinteza vojo de Taxol surbaze de 10-deacetilbaccatin ⅲ.
En ĉi tiu poŝto, la Taxus-planto-eltiraĵo estis purigita per ekbrila prepara likva kromatografia sistemo SepABean ™ -karto en kombinaĵo kun Flash-kartoĉoj de Seplaflash C18 (RP) produktitaj de Santai Technologies. La celata produkto plenumanta la purecajn postulojn estis akirita kaj uzebla en posta scienca esplorado, ofertante kostefikan solvon por la rapida purigo de ĉi tiu speco de naturaj produktoj.
| Instrumento | SepAbean ™ Maŝino | |
| Kartoĉo | 12 G Sepaflash C18 RP Flash-kartoĉo (sfera siliko, 20-45μm, 100 Å, ordo-nombro ： SW-5222-012-SP) | |
| Ondolongo | 254 nm (detekto), 280 nm (monitorado) | |
| Poŝtelefona Fazo | Solvilo A: Akvo | |
| Solvilo B: Metanolo | ||
| Fluokvanto | 15 ml/min | |
| Specimeno ŝarĝante | 20 mg kruda specimeno dissolvita en 1 ml DMSO | |
| Gradiento | Tempo (min) | Solvilo B (%) |
| 0 | 10 | |
| 5 | 10 | |
| 7 | 28 | |
| 14 | 28 | |
| 16 | 40 | |
| 20 | 60 | |
| 27 | 60 | |
| 30 | 72 | |
| 40 | 72 | |
| 43 | 100 | |
| 45 | 100 | |
Rezultoj kaj Diskuto
La flash -kromatogramo por la kruda eltiraĵo el Taxus estis montrita en Figuro 2. Per analizado de la kromatogramo, la cela produkto kaj la malpuraĵoj atingis bazan apartigon. Plue, bona reproduktebleco ankaŭ realiĝis per multoblaj specimenaj injektoj (datumoj ne montritaj). Pasos ĉirkaŭ 4 horoj por kompletigi la apartigon en mana kromatografia metodo kun vitraj kolumnoj. Komparante kun tradicia mana kromatografia metodo, la aŭtomata puriga metodo en ĉi tiu afiŝo nur postulas 44 minutojn por plenumi la tutan purigan taskon (kiel montrite en Figuro 3). Pli ol 80% de la tempo kaj granda kvanto da solvilo povas esti ŝparitaj per aŭtomata metodo, kio povas efike redukti la koston kaj multe plibonigi la laboran efikecon.
Figuro 2. La fulmokromatogramo de kruda eltiraĵo el Taxus.
Figuro 3. La komparo de mana kromatografia metodo kun aŭtomata puriga metodo.
Konklude, kombini SepaFlash C18 RP -flash -kartoĉojn kun SepAbean ™ -maŝino povas oferti rapidan kaj efikan solvon por la rapida purigo de naturaj produktoj kiel Taxus -eltiraĵo.
Referencoj
1. Alushin GM, Lander GC, Kellogg EH, Zhang R, Baker D kaj Nogales E. Alt-rezoluciaj mikrotubulaj strukturoj malkaŝas la strukturajn transirojn en αβ-tubulino post GTP-hidrolizo. Ĉelo, 2014, 157 (5), 1117-1129.
2. Burkhart CA, Berman JW, Swindell CS kaj Horwitz SB. Rilato inter la strukturo de Taxol kaj aliaj taksanoj pri indukto de tumora nekrosis-faktoro-α-gena esprimo kaj citotokseco. Kancero-Esploro, 1994, 54 (22), 5779-5782.
3. Park SJ, Wu CH, Gordon JD, Zhong X, Emami A kaj Safa AR. Taxol induktas kaspase-10-dependan apoptozon, J. Biol. Chem., 2004, 279, 51057-51067.
4. Paclitaxel. La Usona Socio de San-Sistemaj Apotekistoj. [2 januaro 2015]
5. Bruce Ganem kaj Roland R. Franke. Paclitaxel de Primaraj Taksanoj: Perspektivo pri Krea Invento en Organozirkonio -Kemio. J. Org. Chem., 2007, 72 (11), 3981-3987.
Ekzistas serio de la Flash -kartoĉoj de Seaflash C18 RP kun malsamaj specifoj de Santai -teknologio (kiel montras Tabelo 2).
| Item Numero | Kolumna grandeco | Fluokvanto (ml/min) | Max.pressure (PSI/Trinkejo) |
| SW-5222-004-SP | 5.4 G | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP | 105 G | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
Tabelo 2. Sepaflash C18 RP Flash -kartoĉoj.
Pakaj Materialoj: Alt-efika sfera C18-ligita siliko, 20-45 μm, 100 Å
Por pliaj informoj pri detalaj specifoj de SepABean ™ Maŝino, aŭ la mendaj informoj pri Flash -kartoĉoj de Seria Serio, bonvolu viziti nian retejon
Afiŝotempo: Sep-20-2018