Mingzu Yang, Bo Xu
Aplika R&D-Centro
Enkonduko
Antibiotikoj estas klaso de sekundaraj metabolitoj produktitaj de mikroorganismoj (inkluzive de bakterioj, fungoj, aktinomicetoj) aŭ similaj kunmetaĵoj kiuj estas kemie sintezitaj aŭ duonsintezitaj.Antibiotikoj povus malhelpi la kreskon kaj supervivon de aliaj mikroorganismoj.La unua antibiotiko malkovrita de homo, penicilino, estis malkovrita fare de brita mikrobiologo Alexander Fleming en 1928. Li observis ke la bakterioj en la najbareco de la ŝimo ne povis kreski en la stafilokoko kulturplado kiu estis poluita kun ŝimo.Li postulis ke la ŝimo devas kaŝi kontraŭbakterian substancon, kiun li nomis penicilino en 1928. Tamen, la aktivaj ingrediencoj ne estis purigitaj en tiu tempo.En 1939, Ernst Chain kaj Howard Florey de Oxford University decidis evoluigi medikamenton kiu povis trakti bakteriajn infektojn.Post kontakti Fleming por akiri trostreĉojn, ili sukcese ĉerpis kaj purigis penicilinon el la trostreĉoj.Por ilia sukcesa evoluo de penicilino kiel terapia medikamento, Fleming, Chain kaj Florey dividis la 1945-datita Nobel-premion pri Medicino.
Antibiotikoj estas uzataj kiel kontraŭbakteriaj agentoj por trakti aŭ malhelpi bakteriajn infektojn.Ekzistas pluraj ĉefaj kategorioj da antibiotikoj uzataj kiel kontraŭbakteriaj agentoj: β-laktamaj antibiotikoj (inkluzive de penicilino, cefalosporino, ktp.), aminoglikozidaj antibiotikoj, makrolidaj antibiotikoj, tetraciclina antibiotikoj, kloramfenikolo (totala sinteza antibiotiko), kaj ktp. La fontoj de antibiotikoj inkluzivas biologia fermentado, duonsintezo kaj totala sintezo.La antibiotikoj produktitaj per biologia fermentado devas esti strukture modifitaj per kemiaj metodoj pro kemia stabileco, toksaj kromefikoj, kontraŭbakteria spektro kaj aliaj aferoj.Post kemie modifitaj, la antibiotikoj povus atingi pliigitan stabilecon, reduktitajn toksajn kromefikojn, vastigis kontraŭbakterian spektron, reduktitan medikament-reziston, plibonigitan biohaveblecon, kaj tiel plibonigitan efikon de drogtraktado.Tial, duonsintezaj antibiotikoj estas nuntempe la plej populara direkto en la disvolviĝo de antibiotikaj drogoj.
En la disvolviĝo de duonsintezaj antibiotikoj, antibiotikoj havas la ecojn de malalta pureco, multaj kromproduktoj kaj kompleksaj komponentoj ĉar ili estas derivitaj de mikrobaj fermentaj produktoj.En ĉi tiu kazo, la analizo kaj kontrolo de malpuraĵoj en duonsintezaj antibiotikoj estas aparte grava.Por efike identigi kaj karakterizi malpuraĵojn, necesas akiri sufiĉan kvanton da malpuraĵoj el la sinteza produkto de duonsintezaj antibiotikoj.Inter la komune uzataj malpuraĵaj preparteknikoj, fulm-kromatografio estas kostefika metodo kun avantaĝoj kiel granda specimena ŝarĝo-kvanto, malalta kosto, tempoŝparado, ktp. Flash-kromatografio estas pli kaj pli uzata de sintezaj esploristoj.
En ĉi tiu afiŝo, la ĉefa malpureco de duonsinteza aminoglikozida antibiotiko estis utiligita kiel la specimeno kaj purigita per SepaFlash C18AQ-kartoĉo kombinita kun la fulm-kromatografiosistemo SepaBean™-maŝino.La cela produkto plenumanta la postulojn estis sukcese akirita, sugestante tre efikan solvon por la purigado de ĉi tiuj komponaĵoj.
Eksperimenta Sekcio
La specimeno estis afable provizita de loka farmacia kompanio.La provaĵo estis speco de aminopoliciklaj karbonhidratoj kaj ĝia molekula strukturo estis simila kun aminoglikozidaj antibiotikoj.La poluseco de la provaĵo estis sufiĉe alta, igante ĝin tre solvebla en akvo.La skema diagramo de la molekula strukturo de la specimeno estis montrita en Figuro 1. La pureco de la kruda specimeno estis proksimume 88% kiel analizita de HPLC.Por la purigo de ĉi tiuj kunmetaĵoj de alta poluseco, la specimeno estus apenaŭ retenita sur la regulaj C18-kolumnoj laŭ niaj antaŭaj spertoj.Tial, kolumno C18AQ estis utiligita por la provpurigo.
Figuro 1. La skema diagramo de la molekula strukturo de la specimeno.
Por prepari la specimenan solvon, 50 mg kruda specimeno estis solvita en 5 mL pura akvo kaj poste ultrasonikita por igi ĝin tute klara solvo.La provaĵosolvo tiam estis injektita en la fulmkolonon per injekciilo.La eksperimenta aranĝo de la fulmpurigo estis listigita en la Tabelo 1.
| Instrumento | SepaBean™-maŝino 2 | |
| Kartoĉoj | 12 g SepaFlash C18AQ RP-fulmkartoĉo (sfera silicoksido, 20 - 45μm, 100 Å, mendonumero: SW-5222-012-SP(AQ)) | |
| Ondolongo | 204 nm, 220 nm | |
| Movebla fazo | Solvento A: Akvo Solvento B: Acetonitrilo | |
| Flukvanto | 15 ml/min | |
| Ekzempla ŝarĝo | 50 mg | |
| Gradiento | Tempo (min) | Solvento B (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47.0 | 80 | |
| 52.0 | 80 | |
Rezultoj kaj diskuto
La fulmkromatogramo de la provaĵo sur la C18AQ-kartoĉo estis montrita en Figuro 2. Kiel montrite en Figuro 2, la tre polusa provaĵo estis efike retenita sur la C18AQ-kartoĉo.Post lioforigo por la kolektitaj frakcioj, la cela produkto havis purecon de 96.2% (kiel montrite en Figuro 3) per HPLC-analizo.La rezultoj indikis ke la purigita produkto povus esti plu utiligita en la sekva paŝo esplorado kaj evoluo.
Figuro 2. La fulm-kromatogramo de la provaĵo sur C18AQ-kartoĉo.
Figuro 3. La HPLC-kromatogramo de la cela produkto.
En konkludo, SepaFlash C18AQ RP-fulmkartoĉo kombinita kun la fulm-kromatografia sistemo SepaBean™-maŝino povus proponi rapidan kaj efikan solvon por la purigado de tre polusaj specimenoj.
Pri la SepaFlash C18AQ RP-fulmaj kartoĉoj
Estas serio de la SepaFlash C18AQ RP-fulmkartoĉoj kun malsamaj specifoj de Santai Technology (kiel montrite en Tabelo 2).
| Item Nombro | Kolumna Grandeco | Fluo-Indico (ml/min) | Maksimuma.Premo (psi/trinkejo) |
| SW-5222-004-SP(AQ) | 5,4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP(AQ) | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP(AQ) | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP(AQ) | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP(AQ) | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP (AQ) | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP (AQ) | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP (AQ) | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
Tablo 2. SepaFlash C18AQ RP-flash-kartoĉoj.Pakaĵmaterialoj: Alt-efikeca sfera C18(AQ)-ligita siliko, 20 - 45 μm, 100 Å.
Por pliaj informoj pri detalaj specifoj de SepaBean™-maŝino aŭ la mendaj informoj pri fulmaj kartoĉoj de la serio SepaFlash, bonvolu viziti nian retejon.
Afiŝtempo: Oct-26-2018