Μηχάνημα SepaBean™

Η εξισορρόπηση της στήλης μπορεί να προστατεύσει τη στήλη από ζημιά από εξώθερμη επίδραση όταν ο διαλύτης ξεπλένεται γρήγορα μέσα από τη στήλη. Ενώ το ξηρό πυρίτιο προσυσκευασμένο στη στήλη έρχεται σε επαφή με τον διαλύτη για πρώτη φορά κατά τη διάρκεια της λειτουργίας διαχωρισμού, μπορεί να απελευθερωθεί πολλή θερμότητα ειδικά όταν ο διαλύτης ξεπλένεται με υψηλή ταχύτητα ροής. Αυτή η θερμότητα μπορεί να προκαλέσει παραμόρφωση του σώματος της στήλης και συνεπώς διαρροή διαλύτη από τη στήλη. Σε ορισμένες περιπτώσεις, αυτή η θερμότητα μπορεί επίσης να βλάψει το ευαίσθητο στη θερμότητα δείγμα.

Μπορεί να προκαλείται από την έλλειψη λιπαντικού λαδιού στον περιστρεφόμενο άξονα της αντλίας.

Ο συνολικός όγκος των σωληνώσεων του συστήματος, των συνδετήρων και του θαλάμου ανάμιξης είναι περίπου 25 mL.

Η κυψέλη ροής της μονάδας ανιχνευτή έχει μολυνθεί από το δείγμα που έχει ισχυρή απορρόφηση UV. Ή μπορεί να οφείλεται στην απορρόφηση του διαλύτη UV που είναι φυσιολογικό φαινόμενο. Κάντε την ακόλουθη λειτουργία:

1. Αφαιρέστε τη στήλη φλας και ξεπλύνετε τη σωλήνωση του συστήματος με ισχυρά πολικό διαλύτη και στη συνέχεια με ασθενώς πολικό διαλύτη.

2. Πρόβλημα απορρόφησης UV διαλύτη: π.χ. ενώ ως διαλύτης έκλουσης χρησιμοποιούνται n-εξάνιο και διχλωρομεθάνιο (DCM), καθώς η αναλογία του DCM αυξάνεται, η γραμμή βάσης του χρωματογράμματος μπορεί να συνεχίσει να είναι κάτω από το μηδέν στον άξονα Υ από την απορρόφηση του DCM στα 254 nm είναι χαμηλότερη από αυτή του η-εξανίου. Σε περίπτωση που συμβεί αυτό το φαινόμενο, μπορούμε να το χειριστούμε κάνοντας κλικ στο κουμπί «Μηδέν» στη σελίδα εκτέλεσης διαχωρισμού στην εφαρμογή SepaBean.

3. Η κυψέλη ροής της μονάδας ανιχνευτή είναι πολύ μολυσμένη και πρέπει να καθαριστεί με υπερήχους.

Μπορεί να οφείλεται στο ότι οι σύνδεσμοι στην κεφαλή του στηρίγματος της στήλης καθώς και στο τμήμα βάσης έχουν διογκωθεί από διαλύτη, έτσι ώστε οι σύνδεσμοι να έχουν κολλήσει.

Ο χρήστης μπορεί να σηκώσει χειροκίνητα την κεφαλή συγκράτησης στήλης χρησιμοποιώντας λίγη δύναμη. Όταν η κεφαλή της βάσης στήλης ανυψωθεί σε ένα ορισμένο ύψος, η κεφαλή της βάσης στήλης θα πρέπει να μπορεί να μετακινηθεί αγγίζοντας τα κουμπιά πάνω της. Εάν η κεφαλή της βάσης στήλης δεν μπορεί να σηκωθεί χειροκίνητα, ο χρήστης θα πρέπει να επικοινωνήσει με την τοπική τεχνική υποστήριξη.

Εναλλακτική μέθοδος έκτακτης ανάγκης: Ο χρήστης μπορεί να εγκαταστήσει τη στήλη στο επάνω μέρος της κεφαλής της βάσης στήλης. Το υγρό δείγμα μπορεί να εγχυθεί απευθείας στη στήλη. Η στήλη φόρτωσης συμπαγούς δείγματος μπορεί να εγκατασταθεί στο επάνω μέρος της στήλης διαχωρισμού.

1. Χαμηλή ενέργεια πηγής φωτός.

2. Η πισίνα κυκλοφορίας είναι μολυσμένη. Διαισθητικά, δεν υπάρχει φασματική κορυφή ή η φασματική κορυφή είναι μικρή στον διαχωρισμό , Τα ενεργειακά φάσματα εμφανίζουν τιμή μικρότερη από 25%.

Ξεπλύνετε το σωληνάριο με κατάλληλο διαλύτη στα 10 ml/min για 30 λεπτά και παρατηρήστε το ενεργειακό φάσμα. Εάν δεν υπάρχει αλλαγή στο φάσμα, φαίνεται χαμηλή ενέργεια πηγής φωτός, αντικαταστήστε τη λάμπα δευτερίου. Εάν το φάσμα αλλάξει, η πισίνα κυκλοφορίας είναι μολυσμένη, συνεχίστε να καθαρίζετε με κατάλληλο διαλύτη.

Ελέγχετε τακτικά το σωλήνα και τον σύνδεσμο.

Το μήκος κύματος ανίχνευσης ορίζεται σε μήκος κύματος μικρότερο από 245 nm, καθώς ο οξικός αιθυλεστέρας έχει ισχυρή απορρόφηση στο εύρος ανίχνευσης μικρότερο από 245 nm. Η μετατόπιση της γραμμής βάσης θα είναι πιο κυρίαρχη όταν χρησιμοποιείται οξικός αιθυλεστέρας ως διαλύτης έκλουσης και επιλέγουμε 220 nm ως μήκος κύματος ανίχνευσης.

Αλλάξτε το μήκος κύματος ανίχνευσης. Συνιστάται να επιλέξετε 254nm ως μήκος κύματος ανίχνευσης. Εάν τα 220 nm είναι το μόνο μήκος κύματος που είναι κατάλληλο για την ανίχνευση δείγματος, ο χρήστης θα πρέπει να συλλέξει το υγρό έκλουσης με προσεκτική κρίση και σε αυτήν την περίπτωση μπορεί να συλλεχθεί υπερβολικός διαλύτης.

Καθαρίστε εντελώς την κεφαλή του φίλτρου διαλύτη για να αφαιρέσετε τυχόν ακαθαρσίες. Χρησιμοποιήστε αιθανόλη ή ισοπροπανόλη για να ξεπλύνετε πλήρως το σύστημα για να αποφύγετε προβλήματα μη αναμίξιμου διαλύτη.

Για να καθαρίσετε την κεφαλή του φίλτρου διαλύτη, αποσυναρμολογήστε το φίλτρο από την κεφαλή του φίλτρου και καθαρίστε το με μια μικρή βούρτσα. Στη συνέχεια πλύνετε το φίλτρο με αιθανόλη και στεγνώστε το με πιστολάκι. Συναρμολογήστε ξανά την κεφαλή του φίλτρου για μελλοντική χρήση.

Είτε μετάβαση από τον κανονικό διαχωρισμό φάσης σε διαχωρισμό αντίστροφης φάσης ή αντίστροφα, η αιθανόλη ή η ισοπροπανόλη θα πρέπει να χρησιμοποιείται ως διαλύτης μετάβασης για την πλήρη έκπλυση τυχόν μη αναμίξιμων διαλυτών στη σωλήνωση.

Προτείνεται να ρυθμίσετε τον ρυθμό ροής στα 40 mL/min για να ξεπλύνετε τις γραμμές διαλύτη και όλες τις εσωτερικές σωληνώσεις.

Επανατοποθετήστε το κάτω μέρος της θήκης κολόνας αφού χαλαρώσετε τη βίδα.

1. Ο ρυθμός ροής του συστήματος είναι πολύ υψηλός για την τρέχουσα στήλη φλας.

2. Το δείγμα έχει μικρή διαλυτότητα και κατακρημνίζεται από την κινητή φάση, με αποτέλεσμα να μπλοκάρει τη σωλήνωση.

3. Άλλος λόγος προκαλεί απόφραξη των σωλήνων.