Mingzu Yang, Bo xu
F & E -Zentrum für Anwendungen
Einführung
Antibiotika sind eine Klasse von sekundären Metaboliten, die von Mikroorganismen (einschließlich Bakterien, Pilzen, Actinomyceten) oder ähnlichen Verbindungen produziert werden, die chemisch synthetisiert oder semi-synthetisiert werden. Antibiotika könnten das Wachstum und das Überleben anderer Mikroorganismen hemmen. Das erste von Human Penicillin entdeckte Antibiotikum wurde 1928 vom britischen Mikrobiologen Alexander Fleming entdeckt. Er beobachtete, dass die Bakterien in der Nähe der Form nicht in der mit Schimmel kontaminierten Staphylococcus -Kulturschale wachsen konnten. Er postulierte, dass die Form eine antibakterielle Substanz absondern muss, die er 1928 Penicillin nannte. Die Wirkstoffe wurden jedoch zu diesem Zeitpunkt nicht gereinigt. 1939 beschlossen Ernst Chain und Howard Florey von der Universität Oxford, ein Medikament zu entwickeln, das Bakterieninfektionen behandeln konnte. Nachdem sie Fleming kontaktiert hatten, um Stämme zu erhalten, extrahierten sie Penicillin erfolgreich aus den Stämmen. Für ihre erfolgreiche Entwicklung von Penicillin als therapeutische Droge teilten Fleming, Kette und Florey den Nobelpreis von 1945 in Medizin.
Antibiotika werden als antibakterielle Mittel zur Behandlung oder Vorbeugung von bakteriellen Infektionen verwendet. Es gibt mehrere Hauptkategorien von Antibiotika, die als antibakterielle Mittel verwendet werden: β-Lactam-Antibiotika (einschließlich Penicillin, Cephalosporin usw.), Aminoglycosid-Antibiotika, Makrolidantibiotika, Tetracyclin-Antibiotika, Chloramphen-Antibiotika (Tothetik-Antibiotikum) und usw., usw., usw., usw., usw., usw., usw., usw., usw., usw., usw., usw., usw., usw., usw. thethetic, usw. Semi-Synthese und Gesamtsynthese. Die durch biologischen Fermentation erzeugten Antibiotika müssen durch chemische Methoden aufgrund chemischer Stabilität, toxischen Nebenwirkungen, antibakteriellem Spektrum und anderen Problemen strukturell modifiziert werden. Nach chemisch modifiziertem Modifizieren könnten die Antibiotika eine erhöhte Stabilität, verringerte toxische Nebenwirkungen, erweitertes antibakterielles Spektrum, verringerte Arzneimittelresistenz, verbesserte Bioverfügbarkeit und damit verbesserte Wirkung der medikamentösen Behandlung erzielen. Daher sind synthetische Antibiotika derzeit die beliebteste Richtung in der Entwicklung von Antibiotika-Medikamenten.
Bei der Entwicklung synthetischer Antibiotika haben Antibiotika die Eigenschaften einer geringen Reinheit, viele Nebenprodukte und komplexe Komponenten, da sie aus mikrobiellen Fermentationsprodukten stammen. In diesem Fall ist die Analyse und Kontrolle von Verunreinigungen bei synthetischen Antibiotika besonders wichtig. Um Verunreinigungen effektiv zu identifizieren und zu charakterisieren, ist es notwendig, eine ausreichende Menge an Verunreinigungen aus dem synthetischen Produkt synthetischer Antibiotika zu erhalten. Unter den häufig verwendeten Verunreinigungsvorbereitungstechniken ist die Flash-Chromatographie eine kostengünstige Methode mit Vorteilen wie großer Stichprobenladungsmenge, niedriger Kosten, zeitlicher Einsparung usw. Die Flash-Chromatographie wurde von synthetischen Forschern immer mehr verwendet.
In diesem Beitrag wurde die Hauptverunreinigung eines halbsynthetischen Aminoglycosid-Antibiotikums als Probe verwendet und durch eine Sepaflash-C18AQ-Patrone in Kombination mit der Sepababean ™ -Maschine des Flash-Chromatographiesystems gereinigt. Das Zielprodukt, das die Anforderungen erfüllt, wurde erfolgreich erfasst, was auf eine hocheffiziente Lösung für die Reinigung dieser Verbindungen hinweist.
Versuchsabschnitt
Die Stichprobe wurde freundlicherweise von einem örtlichen Pharmaunternehmen bereitgestellt. Die Probe war eine Art von Amino -polyzyklischen Kohlenhydraten und ihre molekulare Struktur war mit Aminoglycosid -Antibiotika ähnlich. Die Polarität der Probe war ziemlich hoch und machte sie in Wasser sehr löslich. Das schematische Diagramm der molekularen Struktur der Probe wurde in Abbildung 1 dargestellt. Die Reinheit der Rohprobe betrug etwa 88%, wie durch HPLC analysiert. Für die Reinigung dieser Verbindungen mit hoher Polarität würde die Probe in den regulären C18 -Säulen entsprechend unseren früheren Erfahrungen kaum aufbewahrt. Daher wurde eine C18AQ -Säule für die Probenreinigung verwendet.
Abbildung 1. Das schematische Diagramm der molekularen Struktur der Probe.
Um die Probenlösung vorzubereiten, wurde 50 mg rohe Probe in 5 ml reinem Wasser gelöst und dann ultraschalliert, damit sie zu einer vollständig klaren Lösung wird. Die Probenlösung wurde dann durch einen Injektor in die Flash -Spalte injiziert. Die experimentelle Einrichtung der Flash -Reinigung wurde in Tabelle 1 aufgeführt.
| Instrument | Sepabean ™ Maschine 2 | |
| Patronen | 12 G Sepaflash C18AQ RP Flash-Patrone (sphärische Siliciumdioxid, 20-45 μm, 100 Å, Bestellnummer: SW-5222-012-SP (aq))) | |
| Wellenlänge | 204 nm, 220 nm | |
| Mobile Phase | Lösungsmittel A: Wasser Lösungsmittel B: Acetonitril | |
| Durchflussrate | 15 ml/min | |
| Probenbelastung | 50 mg | |
| Gradient | Zeit (min) | Lösungsmittel B (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47.0 | 80 | |
| 52.0 | 80 | |
Ergebnisse und Diskussion
Das Flash -Chromatogramm der Probe auf der C18AQ -Patrone wurde in Abbildung 2 dargestellt. Wie in Abbildung 2 gezeigt, wurde die hochpolare Probe effektiv auf der C18AQ -Patrone aufbewahrt. Nach der Lyopholisierung für die gesammelten Fraktionen hatte das Zielprodukt eine Reinheit von 96,2% (wie in Abbildung 3 gezeigt) durch HPLC -Analyse. Die Ergebnisse zeigten, dass das gereinigte Produkt in der nächsten Stufe Forschung und Entwicklung weiter genutzt werden könnte.
Abbildung 2. Das Flash -Chromatogramm der Probe auf einer C18AQ -Patrone.
Abbildung 3. Das HPLC -Chromatogramm des Zielprodukts.
Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die Sepaflash -C18AQ -RP -Flash -Patrone in Kombination mit der Flash -Chromatography -System -Sepabean ™ -Maschine eine schnelle und effektive Lösung für die Reinigung hochpolarer Proben bieten kann.
Über die Sepaflash C18AQ RP -Flash -Patronen
Es gibt eine Reihe der Sepaflash -C18AQ -RP -Flash -Patronen mit unterschiedlichen Spezifikationen aus der Santai -Technologie (wie in Tabelle 2 gezeigt).
| Artikelnummer | Säulengröße | Durchflussrate (ml/min) | Max.pressur (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP (AQ) | 5.4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP (aq) | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP (aq) | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP (AQ) | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP (AQ) | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP (AQ) | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP (AQ) | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
Tabelle 2. Sepaflash C18AQ RP Flash -Patronen. Verpackungsmaterialien: Hocheffizienz kugelförmiger C18 (aq) -bonded Silica, 20-45 μm, 100 Å.
Weitere Informationen zu detaillierten Spezifikationen des Sepabean ™ -Machags oder zu den Bestellinformationen zu den Flash -Patronen der Sepaflash -Serie finden Sie auf unserer Website.
Postzeit: Okt-26-2018