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Wie verbinde ich leere iLOK-Säulen mit dem Biotage-System?
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Löst sich funktionalisiertes Silica in Wasser?
Nein, endverkapptes Silica ist in allen gängigen organischen Lösungsmitteln unlöslich.
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Was ist beim Einsatz von C18-Blitzsäulen zu beachten?
Für eine optimale Reinigung mit C18-Flash-Säulen befolgen Sie bitte diese Schritte:
① Spülen Sie die Säule mit 100 % des starken (organischen) Lösungsmittels für 10 – 20 CVs (Säulenvolumen), typischerweise Methanol oder Acetonitril.
② Spülen Sie die Säule für weitere 3–5 CVs mit 50 %iger starker und 50 %iger wässriger Lösung (falls Zusatzstoffe erforderlich sind, fügen Sie diese hinzu).
③ Spülen Sie die Säule mit den anfänglichen Gradientenbedingungen für 3 – 5 CVs. -
Was ist der Anschluss für große Blitzsäulen?
Für Säulengrößen zwischen 4 g und 330 g wird in diesen Blitzsäulen ein Standard-Luer-Anschluss verwendet. Für Säulengrößen von 800 g, 1600 g und 3000 g sollten zusätzliche Anschlussadapter verwendet werden, um diese großen Flash-Säulen am Flash-Chromatographiesystem zu montieren. Weitere Einzelheiten finden Sie im Dokument „Santai Adapter Kit for 800g, 1600g, 3kg Flash Columns“.
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Kann die Silica-Kartusche mit Methanol eluiert werden oder nicht?
Für Normalphasensäulen wird empfohlen, die mobile Phase zu verwenden, bei der der Methanolanteil 25 % nicht überschreitet.
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Was ist die Grenze für die Verwendung polarer Lösungsmittel wie DMSO, DMF?
Im Allgemeinen wird empfohlen, die mobile Phase zu verwenden, wenn der Anteil der polaren Lösungsmittel 5 % nicht überschreitet. Zu den polaren Lösungsmitteln gehören DMSO, DMF, THF, TEA usw.
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Lösungen für die Beladung fester Proben?
Das Laden fester Proben ist eine nützliche Technik, um die zu reinigende Probe auf eine Säule zu laden, insbesondere bei Proben mit geringer Löslichkeit. In diesem Fall ist die iLOK-Flash-Cartridge eine sehr geeignete Wahl.
Im Allgemeinen wird die Probe in einem geeigneten Lösungsmittel gelöst und an einem festen Adsorptionsmittel adsorbiert, bei dem es sich um das gleiche handeln kann, das auch in Flash-Säulen verwendet wird, einschließlich Kieselgur oder Siliciumdioxid oder anderen Materialien. Nach der Entfernung/Verdampfung des restlichen Lösungsmittels wird das Adsorptionsmittel auf eine teilweise gefüllte Säule oder in eine leere Feststoffkartusche gegeben. Ausführlichere Informationen finden Sie im Dokument iLOK-SL-Cartridge-Benutzerhandbuch. -
Was ist die Testmethode des Säulenvolumens für die Flash-Säule?
Das Säulenvolumen entspricht ungefähr dem Totvolumen (VM), wenn man das zusätzliche Volumen in den Schläuchen, die die Säule mit dem Injektor und dem Detektor verbinden, außer Acht lässt.
Die Totzeit (tM) ist die Zeit, die zur Elution einer nicht zurückgehaltenen Komponente erforderlich ist.
Das Totvolumen (VM) ist das Volumen der mobilen Phase, das zur Elution einer nicht zurückgehaltenen Komponente erforderlich ist. Das Totvolumen kann mit der folgenden Gleichung berechnet werden:VM =F0*tM.
In der obigen Gleichung ist F0 die Durchflussrate der mobilen Phase.
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Löst sich funktionalisiertes Silica in Methanol oder einem der anderen organischen Standardlösungsmittel?
Nein, endverkapptes Silica ist in allen gängigen organischen Lösungsmitteln unlöslich.
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Ob die Silica-Flash-Kartusche wiederholt verwendet werden kann oder nicht?
Die Silica-Flash-Säulen sind Einwegartikel und für den einmaligen Gebrauch bestimmt. Bei richtiger Handhabung können die Silica-Kartuschen jedoch ohne Leistungseinbußen wiederverwendet werden.
Um wiederverwendet zu werden, muss die Silica-Flash-Säule einfach mit Druckluft getrocknet oder mit Isopropanol gespült und darin gelagert werden. -
Was sind die geeigneten Aufbewahrungsbedingungen für C18-Blitzkassetten?
Bei ordnungsgemäßer Lagerung können C18-Flash-Säulen wiederverwendet werden:
• Lassen Sie die Säule nach dem Gebrauch niemals austrocknen.
• Entfernen Sie alle organischen Modifikatoren, indem Sie die Säule 3 – 5 CVs lang mit 80 % Methanol oder Acetonitril in Wasser spülen.
• Bewahren Sie die Säule mit angebrachten Endanschlüssen im oben genannten Spüllösungsmittel auf. -
Fragen zum thermischen Effekt im Vorgleichgewichtsprozess für Flash-Säulen?
Bei großen Säulen über 220 g ist der thermische Effekt im Prozess des Vorgleichgewichts offensichtlich. Es wird empfohlen, die Durchflussrate im Vorgleichgewichtsprozess auf 50–60 % der empfohlenen Durchflussrate einzustellen, um offensichtliche thermische Effekte zu vermeiden.
Der thermische Effekt gemischter Lösungsmittel ist offensichtlicher als bei einzelnen Lösungsmitteln. Nehmen wir als Beispiel das Lösungsmittelsystem Cyclohexan/Ethylacetat. Es wird empfohlen, im Vorgleichgewichtsprozess 100 % Cyclohexan zu verwenden. Wenn die Voräquilibrierung abgeschlossen ist, kann das Trennungsexperiment gemäß dem voreingestellten Lösungsmittelsystem durchgeführt werden.
