SepaFlash™ kolonne

Santai Solvent Lines Kit & tilbehør

Nej, endelukket silica er uopløseligt i et almindeligt anvendt organisk opløsningsmiddel.

For optimal oprensning med C18 flash-søjler skal du følge disse trin:
① Skyl kolonnen med 100 % af det stærke (organiske) opløsningsmiddel i 10 – 20 CV'er (søjlevolumen), typisk methanol eller acetonitril.
② Skyl kolonnen med 50 % stærk + 50 % vandig (hvis tilsætningsstoffer er påkrævet, medtag dem) i yderligere 3 – 5 CV'er.
③ Skyl søjlen med de indledende gradientbetingelser for 3 – 5 CV'er.

Til søjlestørrelser mellem 4g og 330g bruges standard Luer-stik i disse flash-søjler. For søjlestørrelser på 800g, 1600g og 3000g skal der bruges yderligere konnektoradaptere til at montere disse store flashsøjler på flashkromatografisystemet. Se dokumentet Santai Adapter Kit til 800g, 1600g, 3kg Flash Columns for flere detaljer.

For normal fase kolonne anbefales det at bruge den mobile fase, hvor forholdet mellem methanol ikke overstiger 25 %.

Generelt anbefales det at bruge den mobile fase, hvor forholdet mellem de polære opløsningsmidler ikke overstiger 5 %. De polære opløsningsmidler omfatter DMSO, DMF, THF, TEA osv.

Fast prøvebelastning er en nyttig teknik til at påfylde prøven, der skal renses, på en søjle, især for prøver med lav opløselighed. I dette tilfælde er iLOK flash-patron et meget passende valg.
Generelt opløses prøven i et passende opløsningsmiddel og adsorberes på et fast adsorberingsmiddel, som kunne være det samme som anvendt i flashsøjler, herunder diatoméjord eller silica eller andre materialer. Efter fjernelse / fordampning af det resterende opløsningsmiddel, sættes adsorbenten oven på en delvis fyldt søjle eller i en tom fastfyldningspatron. For mere detaljeret information henvises til dokumentet iLOK-SL Cartridge User Guide for flere detaljer.

Kolonnevolumen er omtrent lig med dødvolumen (VM), når man ignorerer det ekstra volumen i slangerne, der forbinder kolonnen med injektoren og detektoren.

Dødtid (tM) er den tid, der kræves til eluering af en ikke-tilbageholdt komponent.

Dødvolumen (VM) er volumenet af den mobile fase, der kræves til eluering af en ikke-tilbageholdt komponent. Dødvolumen kan beregnes ved følgende ligning:VM =F0*tM.

Blandt ovenstående ligning er F0 strømningshastigheden af ​​den mobile fase.

Nej, endelukket silica er uopløseligt i et almindeligt anvendt organisk opløsningsmiddel.

Silica-flashkolonnerne er til engangsbrug, men med korrekt håndtering kan silicapatronerne genbruges uden at ofre ydeevnen.
For at blive genbrugt skal silicaflashkolonnen blot tørres med trykluft eller skylles med og opbevares i isopropanol.

Korrekt opbevaring gør det muligt at genbruge C18 flash-kolonner:
• Lad aldrig kolonnen tørre ud efter brug.
• Fjern alle organiske modificeringsmidler ved at skylle kolonnen med 80 % methanol eller acetonitril i vand i 3 – 5 CV.
• Opbevar kolonnen i ovennævnte skylleopløsningsmiddel med endebeslag på plads.

For de store søjler over 220 g er den termiske effekt tydelig i processen med præ-ligevægt. Det anbefales at indstille flowhastigheden til 50-60 % af den foreslåede flowhastighed i præ-ligevægtsprocessen for at undgå åbenlys termisk effekt.

Den termiske virkning af blandet opløsningsmiddel er mere indlysende end enkelt opløsningsmiddel. Tag opløsningsmiddelsystemet cyclohexan/ethylacetat som eksempel, det foreslås at bruge 100 % cyclohexan i præ-ligevægtsprocessen. Når præ-ækvilibreringen er afsluttet, kan separationseksperimentet udføres i henhold til det forudindstillede opløsningsmiddelsystem.