Mingzu Yang, bo xu
Canolfan Ymchwil a Datblygu cais
Cyflwyniad
Mae gwrthfiotigau yn ddosbarth o fetabolion eilaidd a gynhyrchir gan ficro-organebau (gan gynnwys bacteria, ffyngau, actinomycetes) neu gyfansoddion tebyg sydd wedi'u syntheseiddio'n gemegol neu wedi'u lled-syntheseiddio. Gallai gwrthfiotigau atal twf a goroesiad micro -organebau eraill. Darganfuwyd y gwrthfiotig cyntaf a ddarganfuwyd gan ddynol, penisilin, gan y microbiolegydd Prydeinig Alexander Fleming ym 1928. Sylwodd na allai'r bacteria yng nghyffiniau'r mowld dyfu yn y ddysgl ddiwylliant Staphylococcus a oedd wedi'i halogi â llwydni. Nododd fod yn rhaid i'r mowld ddirgelu sylwedd gwrthfacterol, a enwodd benisilin ym 1928. Fodd bynnag, ni chafodd y cynhwysion actif eu puro bryd hynny. Ym 1939, penderfynodd Ernst Chain a Howard Florey o Brifysgol Rhydychen ddatblygu cyffur a allai drin heintiau bacteriol. Ar ôl cysylltu â Fleming i gael straenau, fe wnaethant dynnu a phuro penisilin o'r straen yn llwyddiannus. Am eu datblygiad llwyddiannus o benisilin fel cyffur therapiwtig, rhannodd Fleming, Chain a Florey Wobr Nobel 1945 mewn Meddygaeth.
Defnyddir gwrthfiotigau fel asiantau gwrthfacterol i drin neu atal heintiau bacteriol. Mae sawl prif gategori o wrthfiotigau yn cael eu defnyddio fel asiantau gwrthfacterol: gwrthfiotigau β-lactam (gan gynnwys penisilin, cephalosporin, ac ati), gwrthfiotigau aminoglycoside, gwrthfiotigau macrolid, gwrthfiotigau fferyllol tetracyclin, ac ati lled-synthesis a chyfanswm synthesis. Mae angen addasu'r gwrthfiotigau a gynhyrchir trwy eplesu biolegol yn strwythurol trwy ddulliau cemegol oherwydd sefydlogrwydd cemegol, sgîl -effeithiau gwenwynig, sbectrwm gwrthfacterol a materion eraill. Ar ôl ei addasu'n gemegol, gallai'r gwrthfiotigau sicrhau mwy o sefydlogrwydd, llai o sgîl -effeithiau gwenwynig, sbectrwm gwrthfacterol estynedig, llai o wrthwynebiad cyffuriau, gwell bioargaeledd, a thrwy hynny well effaith triniaeth cyffuriau. Felly, gwrthfiotigau lled-synthetig yw'r cyfeiriad mwyaf poblogaidd ar hyn o bryd yn natblygiad cyffuriau gwrthfiotig.
Wrth ddatblygu gwrthfiotigau lled-synthetig, mae gan wrthfiotigau briodweddau purdeb isel, llawer o sgil-gynhyrchion a chydrannau cymhleth gan eu bod yn deillio o gynhyrchion eplesu microbaidd. Yn yr achos hwn, mae dadansoddi a rheoli amhureddau mewn gwrthfiotigau lled-synthetig yn arbennig o bwysig. Er mwyn nodi a nodweddu amhureddau yn effeithiol, mae angen cael digon o amhureddau o gynnyrch synthetig gwrthfiotigau lled-synthetig. Ymhlith y technegau paratoi amhuredd a ddefnyddir yn gyffredin, mae cromatograffeg fflach yn ddull cost-effeithiol gyda manteision fel swm llwytho sampl mawr, cost isel, arbed amser, ac ati. Mae cromatograffeg fflach wedi cael ei gyflogi fwyfwy gan ymchwilwyr synthetig.
Yn y swydd hon, defnyddiwyd prif amhuredd gwrthfiotig aminoglycoside lled-synthetig fel y sampl a'i phuro gan getris SepaFlash C18AQ wedi'i gyfuno â'r peiriant system cromatograffeg fflach Sepabean ™. Cafwyd y cynnyrch targed i'r gofynion yn llwyddiannus, gan awgrymu datrysiad effeithlon iawn ar gyfer puro'r cyfansoddion hyn.
Adran arbrofol
Darparwyd y sampl yn garedig gan gwmni fferyllol lleol. Roedd y sampl yn fath o garbohydradau polysyclig amino ac roedd ei strwythur moleciwlaidd yn debyg â gwrthfiotigau aminoglycoside. Roedd polaredd y sampl braidd yn uchel, gan ei gwneud yn hydawdd iawn mewn dŵr. Dangoswyd y diagram sgematig o strwythur moleciwlaidd y sampl yn Ffigur 1. Roedd purdeb y sampl amrwd tua 88% fel y'i dadansoddwyd gan HPLC. Er mwyn puro'r cyfansoddion hyn o bolaredd uchel, prin y byddai'r sampl yn cael ei chadw ar y colofnau C18 rheolaidd yn ôl ein profiadau blaenorol. Felly, defnyddiwyd colofn C18AQ ar gyfer puro sampl.
Ffigur 1. Diagram sgematig strwythur moleciwlaidd y sampl.
I baratoi'r toddiant sampl, diddymwyd sampl crai 50 mg mewn dŵr pur 5 ml ac yna ei ultrasonicated er mwyn gwneud iddo ddod yn ddatrysiad cwbl glir. Yna chwistrellwyd yr hydoddiant sampl i'r golofn fflach gan chwistrellwr. Rhestrwyd setiad arbrofol y puro fflach yn Nhabl 1.
| Offerynnau | Peiriant sepabean ™ 2 | |
| Chetris | 12 G SepaFlash C18AQ RP Cetris fflach (silica sfferig, 20-45μm, 100 Å, rhif archeb ： SW-5222-012-SP (d aq))) | |
| Donfedd | 204 nm, 220 nm | |
| Cyfnod Symudol | Toddydd A: Dŵr Toddydd B: Acetonitrile | |
| Cyfradd llif | 15 ml/min | |
| Llwytho Sampl | 50 mg | |
| Ngraddiant | Amser | Toddydd B (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47.0 | 80 | |
| 52.0 | 80 | |
Canlyniadau a thrafodaeth
Dangoswyd cromatogram fflach y sampl ar y cetris C18AQ yn Ffigur 2. Fel y dangosir yn Ffigur 2, cadwyd y sampl pegynol iawn i bob pwrpas ar y cetris C18AQ. Ar ôl lyoffoli ar gyfer y ffracsiynau a gasglwyd, roedd gan y cynnyrch targed burdeb o 96.2% (fel y dangosir yn Ffigur 3) gan ddadansoddiad HPLC. Roedd y canlyniadau'n dangos y gellid defnyddio'r cynnyrch wedi'i buro ymhellach yn yr ymchwil a'r datblygiad cam nesaf.
Ffigur 2. Cromatogram fflach y sampl ar getris C18AQ.
Ffigur 3. Cromatogram HPLC y cynnyrch targed.
I gloi, gallai cetris fflach SepFlash C18AQ RP ynghyd â pheiriant System Cromatograffeg Flash Sepabean ™ gynnig datrysiad cyflym ac effeithiol ar gyfer puro samplau pegynol iawn.
Ynglŷn â'r cetris fflach sepFlash C18AQ RP
Mae yna gyfres o'r cetris fflach SepFlash C18AQ RP gyda manylebau gwahanol o dechnoleg Santai (fel y dangosir yn Nhabl 2).
| Rhif Eitem | Maint colofn | Cyfradd llif (ml/min) | Max.pressure (psi/bar) |
| SW-5222-004-sp (d) | 5.4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP (d) | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-sp (d) | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-sp (d) | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-sp (d) | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP (d) | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP (d) | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-sp (d) | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
Tabl 2. SepFlash C18AQ RP Cetris fflach. Deunyddiau pacio: silica wedi'i bondio sfferig c18 (aq), 20-45 μm, 100 Å.
I gael rhagor o wybodaeth am fanylebau manwl o beiriant SepAbean ™, neu'r wybodaeth archebu ar getris fflach cyfres sepaFlash, ewch i'n gwefan.
Amser Post: Hydref-26-2018