Mingzu Yang, Bo Xu
Centru R&D di l'applicazione
Introduzione
L'antibiotici sò una classa di metaboliti secundari pruduciuti da i microorganismi (cumprese battìri, fungi, actinomiceti) o composti simili chì sò sintetizzati chimicamente o semi-sintetizzati.L'antibiotici puderanu inibisce a crescita è a sopravvivenza di altri microorganismi.U primu antibioticu scupertu da l'omu, a penicillina, hè statu scupertu da u microbiologu britannicu Alexander Fleming in 1928. Hà osservatu chì a bacteria in u circondu di u moldu ùn pudia micca cresce in u platu di cultura di staphylococcus chì era contaminatu da u muffa.Hà postulatu chì u moldu deve secrete una sustanza antibacteriale, chì hà chjamatu penicillina in u 1928. In ogni casu, l'ingredienti attivi ùn sò micca purificati à quellu tempu.In u 1939, Ernst Chain è Howard Florey di l'Università di Oxford anu decisu di sviluppà una droga chì puderia trattà l'infizzioni bacteriale.Dopu avè cuntattatu Fleming per ottene ceppi, anu estrattu cù successu è purificatu a penicillina da i ceppi.Per u so sviluppu successu di a penicillina cum'è una droga terapeutica, Fleming, Chain è Florey anu spartutu u Premiu Nobel in Medicina in u 1945.
L'antibiotici sò usati com'è agenti antibacterial per trattà o prevene infizzioni bacteriale.Ci hè parechje categurie principali di antibiotici utilizati com'è agenti antibacterial: antibiotici β-lactam (cumpresa penicillina, cefalosporina, etc.), antibiotici aminoglycoside, antibiotici macrolide, antibiotici tetracycline, chloramphenicol (antibioticu sinteticu tutale), etc. I fonti di antibiotici includenu. fermentazione biologica, semi-sintesi è sintesi totale.L'antibiotici pruduciuti da a fermentazione biologica anu da esse mudificati strutturalmente da metudi chimichi per via di stabilità chimica, effetti tossichi, spettru antibacterial è altri prublemi.Dopu a mudificazione chimica, l'antibiotici puderanu ottene una stabilità aumentata, riduzzione di effetti tossichi, spettru antibacterial allargatu, resistenza ridutta à a droga, biodisponibilità mejorata, è cusì un effettu megliu di trattamentu di droga.Dunque, l'antibiotici semi-sintetici sò attualmente a direzzione più populari in u sviluppu di droghe antibiotiche.
In u sviluppu di l'antibiotici semi-sintetichi, l'antibiotici anu e proprietà di purezza bassa, assai prudutti è cumpunenti cumplessi, postu chì sò derivati da i prudutti di fermentazione microbiana.In questu casu, l'analisi è u cuntrollu di impurità in l'antibiotici semi-sintesi hè particularmente impurtante.Per identificà in modu efficace è caratterizà l'impurità, hè necessariu di ottene una quantità sufficiente di impurità da u pruduttu sinteticu di l'antibiotici semi-sintetici.À mezu à i tecnichi priparazioni impurità cumunimenti usatu, cromatografia lampu hè un mètudu costu-efficace cù vantaghji, cum'è grande quantità di carica campionu, bassu costu, risparmiu di tempu, etc. Cromatografia flash hè stata più è più impiegata da circadori sintetici.
In questu post, l'impurità principale di un antibioticu aminoglicoside semi-sinteticu hè stata utilizata cum'è mostra è purificata da una cartuccia SepaFlash C18AQ cumminata cù u sistema di cromatografia flash SepaBean™.U pruduttu di destinazione chì risponde à i requisiti hè stata ottenuta cun successu, suggerendu una soluzione altamente efficiente per a purificazione di questi composti.
Sezione Sperimentale
A mostra hè stata gentilmente furnita da una cumpagnia farmaceutica lucale.A mostra era una spezia di carbuidrati policiclici amino è a so struttura molekulari era simile à l'antibiotici aminoglicoside.A polarità di a mostra era piuttostu alta, facendu assai solubile in acqua.U schema schematicu di a struttura molekulari di a mostra hè statu indicatu in a Figura 1. A purità di a mostra prima era di circa 88% cum'è analizatu da HPLC.Per a purificazione di sti cumposti di alta polarità, a mostra seria appena ritenuta nantu à e culonni C18 regulari secondu e nostre sperienze previ.Dunque, una colonna C18AQ hè stata impiegata per a purificazione di mostra.
Figura 1. U schema schematicu di a struttura moleculare di a mostra.
Per preparà a suluzione di mostra, 50 mg di mostra cruda hè stata dissolta in 5 mL d'acqua pura è poi ultrasonicata per fà diventà una suluzione cumpletamente chjaru.A suluzione di mostra hè stata poi injectata in a colonna flash da un injector.A configurazione sperimentale di a purificazione flash hè stata listata in a Tabella 1.
| Strumentu | macchina SepaBean™ 2 | |
| Cartuccia | Cartuccia flash SepaFlash C18AQ RP da 12 g (silice sferica, 20 - 45μm, 100 Å, Numero d'ordine: SW-5222-012-SP(AQ)) | |
| Lunghezza d'onda | 204 nm, 220 nm | |
| Fase mobile | Solvente A: acqua Solvent B: acetonitrile | |
| Rate di flussu | 15 ml/min | |
| Carica di mostra | 50 mg | |
| Gradient | Tempu (min) | Solvente B (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47,0 | 80 | |
| 52.0 | 80 | |
Risultati è discussione
U cromatogramma flash di a mostra nantu à a cartuccia C18AQ hè stata mostrata in a Figura 2. Cumu si mostra in a Figura 2, a mostra altamente polare hè stata ritenuta in modu efficace nantu à a cartuccia C18AQ.Dopu à a liofolizazione per e frazioni cullate, u pruduttu di destinazione avia una purezza di 96.2% (cum'è mostra in a Figura 3) per l'analisi HPLC.I risultati indicanu chì u pruduttu purificatu puderia esse utilizatu più in u prossimu passu di ricerca è sviluppu.
Figura 2. U cromatogramma flash di a mostra nantu à un cartucciu C18AQ.
Figura 3. U cromatogramma HPLC di u pruduttu di destinazione.
In cunclusione, a cartuccia flash SepaFlash C18AQ RP cumminata cù u sistema di cromatografia flash SepaBean™ macchina puderia offre una soluzione rapida è efficace per a purificazione di campioni altamente polari.
À propositu di e cartucce flash SepaFlash C18AQ RP
Ci hè una serie di cartucce flash SepaFlash C18AQ RP cù diverse specificazioni da Santai Technology (cum'è mostra in a Tabella 2).
| Numeru di l'articulu | Dimensione di a colonna | Rate di flussu (ml/min) | Pressione max (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP(AQ) | 5,4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP(AQ) | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP (AQ) | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP (AQ) | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP (AQ) | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP (AQ) | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP (AQ) | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
Table 2. Cartuccia flash SepaFlash C18AQ RP.Materiali di imballaggio: silice sferica ad alta efficienza C18(AQ), 20 - 45 μm, 100 Å.
Per più infurmazione nantu à e specificazioni dettagliate di a macchina SepaBean™, o l'infurmazioni di ordine nantu à i cartucce flash di a serie SepaFlash, visitate u nostru situ web.
Tempu di pubblicazione: 26-ottobre-2018