Banner sa Balita

Balita

Ang Pagputli sa Taxus Extract pinaagi sa SepaBean ™ Machine

Taxus Extract

Meiyuan Qian, Yuefeng Tan, Bo Xu
Application R&D Center

Pasiuna
Ang Taxus (Taxus chinensis o Chinese yew) kay usa ka ihalas nga tanom nga gipanalipdan sa nasod.Usa kini ka talagsaon ug nameligrong tanom nga gibilin sa Quaternary glacier.Kini usab ang bugtong natural nga tanum nga tambal sa kalibutan.Ang Taxus giapod-apod sa temperate zone sa amihanang bahin sa kalibutan ngadto sa mid-subtropical nga rehiyon, nga adunay mga 11 ka espisye sa kalibutan.Adunay 4 ka espisye ug 1 ka barayti sa China, nga mao ang Northeast Taxus, Yunnan Taxus, Taxus, Tibetan Taxus ug Southern Taxus.Kining lima ka espisye kay gipang-apod-apod sa Southwest China, South China, Central China, East China, Northwest China, Northeast China ug Taiwan.Ang mga tanum nga Taxus adunay daghang lainlain nga sangkap sa kemikal, lakip ang mga taxanes, flavonoids, lignans, steroid, phenolic acid, sesquiterpenes ug glycosides.Ang bantog nga anti-tumor nga tambal nga Taxol (o Paclitaxel) usa ka klase nga taxanes.Ang Taxol adunay talagsaon nga mga mekanismo sa anticancer.Ang Taxol makahimo sa "pag-freeze" sa mga microtubule pinaagi sa pagsuklay niini ug pagpugong sa mga microtubule sa pagbulag sa mga chromosome sa panahon sa cell division, sa ingon mosangpot sa kamatayon sa nagbahin nga mga selula, ilabi na sa paspas nga pagdaghan sa mga selula sa kanser [1].Dugang pa, pinaagi sa pagpaaktibo sa mga macrophage, ang Taxol hinungdan sa pagkunhod sa TNF-α (tumor necrosis factor) nga mga receptor ug pagpagawas sa TNF-α, sa ingon makapatay o makapugong sa mga selula sa tumor [2].Dugang pa, ang Taxol mahimong mag-aghat sa apoptosis pinaagi sa paglihok sa apoptotic receptor nga agianan nga gipataliwala sa Fas / FasL o pagpaaktibo sa cysteine ​​​​protease system [3].Tungod sa daghang target nga anticancer nga epekto, ang Taxol kaylap nga gigamit sa pagtambal sa kanser sa ovarian, kanser sa suso, dili gamay nga kanser sa baga sa selula (NSCLC), kanser sa tiyan, kanser sa esophageal, kanser sa pantog, kanser sa prostate, malignant melanoma, ulo ug liog. kanser, ug uban pa [4].Ilabi na alang sa advanced nga kanser sa suso ug advanced nga kanser sa ovarian, ang Taxol adunay usa ka talagsaon nga curative nga epekto, busa kini nailhan nga "ang katapusan nga linya sa depensa alang sa pagtambal sa kanser".

Ang Taxol mao ang pinakapopular nga tambal nga anticancer sa internasyonal nga merkado sa bag-ohay nga mga tuig ug gikonsiderar nga usa sa labing epektibo nga tambal nga anticancer alang sa mga tawo sa sunod nga 20 ka tuig.Sa bag-ohay nga mga tuig, uban sa pagsabog nga pagtubo sa populasyon ug kanser insidente, ang panginahanglan alang sa Taxol usab misaka sa kamahinungdanon.Sa pagkakaron, ang Taxol nga gikinahanglan alang sa klinikal o siyentipikong panukiduki kasagarang gikuha direkta gikan sa Taxus.Ikasubo, ang sulud sa Taxol sa mga tanum gamay ra.Pananglitan, ang Taxol content kay 0.069% lang sa panit sa Taxus brevifolia, nga kasagarang giisip nga adunay pinakataas nga content.Alang sa pagkuha sa 1 g sa Taxol, nanginahanglan kini mga 13.6 kg nga panit sa Taxus.Base sa kini nga banabana, gikinahanglan ang 3 – 12 ka punoan sa Taxus nga kapin sa 100 ka tuig ang edad aron matambalan ang usa ka pasyente sa ovarian cancer.Ingon usa ka sangputanan, daghang mga punoan sa Taxus ang naputol, nga miresulta sa hapit na mapuo alang niining bililhon nga mga espisye.Dugang pa, ang Taxus kabus kaayo sa mga kapanguhaan ug hinay sa pagtubo, nga nagpalisud sa dugang nga pag-uswag ug paggamit sa Taxol.

Sa pagkakaron, ang kinatibuk-ang synthesis sa Taxol malampuson nga nahuman.Bisan pa, ang sintetikong ruta niini komplikado kaayo ug taas ang gasto, nga naghimo niini nga wala’y importansya sa industriya.Ang semi-synthetic nga pamaagi sa Taxol medyo hingkod na ug gikonsiderar nga epektibong paagi sa pagpalapad sa tinubdan sa Taxol dugang sa artipisyal nga pagpananom.Sa laktud, sa semi-synthesis sa Taxol, ang Taxol precursor compound nga medyo abunda sa Taxus nga mga tanom gikuha ug dayon nakabig ngadto sa Taxol pinaagi sa kemikal nga synthesis.Ang sulod sa 10-deacetylbaccatin Ⅲ sa mga dagom sa Taxus baccata mahimong hangtod sa 0.1%.Ug ang mga dagom dali nga mabag-o kung itandi sa mga panit.Busa, ang semi-synthesis sa Taxol base sa 10-deacetylbaccatin Ⅲ nakadani ug dugang nga pagtagad gikan sa mga tigdukiduki [5] (sama sa gipakita sa Figure 1).

Figure 1. Ang semi-synthetic nga ruta sa Taxol base sa 10-deacetylbaccatin Ⅲ.

Sa kini nga post, ang Taxus extract sa tanum giputli pinaagi sa usa ka flash preparative liquid chromatography system nga SepaBean ™ nga makina sa kombinasyon sa SepaFlash C18 reversed-phase (RP) flash cartridges nga gihimo sa Santai Technologies.Ang target nga produkto nga nagtagbo sa mga kinahanglanon sa kaputli nakuha ug mahimong magamit sa sunud-sunod nga panukiduki sa siyensya, nga nagtanyag usa ka epektibo nga solusyon alang sa paspas nga pagputli sa kini nga klase sa natural nga mga produkto.

Eksperimental nga Seksyon
Sa kini nga post, ang Taxus extracts gigamit isip sample.Ang hilaw nga sample nakuha pinaagi sa pagkuha sa Taxus panit uban sa ethanol.Dayon ang hilaw nga sample natunaw sa DMSO ug gikarga sa flash cartridge.Ang eksperimento nga setup sa flash purification gilista sa Table 1.
Instrumento

Instrumento

SepaBean™ nga makina

Kabhang

12 g SepaFlash C18 RP flash cartridge (spherical silica, 20 - 45μm, 100 Å, Order number:SW-5222-012-SP)

wavelength

254 nm (detection), 280 nm (monitoring)

Mobile nga hugna

Solvent A: Tubig

Solvent B: Methanol

Laygay sa agos

15 mL/min

Sample loading

20 mg nga hilaw nga sample nga natunaw sa 1 mL DMSO

Gradient

Oras (min)

Solvent B (%)

0

10

5

10

7

28

14

28

16

40

20

60

27

60

30

72

40

72

43

100

45

100

Talaan 1. Ang eksperimento nga setup para sa flash purification.

Mga Resulta ug Panaghisgot
Ang flash chromatogram alang sa crude extract gikan sa Taxus gipakita sa Figure 2. Pinaagi sa pag-analisar sa chromatogram, ang target nga produkto ug ang mga hugaw nakab-ot sa baseline separation.Dugang pa, ang maayo nga reproducibility natuman usab sa daghang mga sample injection (wala gipakita ang datos).Moabut ug mga 4 ka oras aron makompleto ang pagbulag sa manual chromatography nga pamaagi nga adunay mga kolum nga bildo.Ang pagtandi sa tradisyonal nga manual chromatography nga pamaagi, ang awtomatik nga pamaagi sa pagputli niini nga post nagkinahanglan lamang og 44 ka minuto aron makompleto ang tibuok nga buluhaton sa pagputli (sama sa gipakita sa Figure 3).Labaw pa sa 80% sa oras ug usa ka dako nga kantidad sa solvent mahimong maluwas pinaagi sa pagkuha sa awtomatik nga pamaagi, nga epektibo nga makunhuran ang gasto ingon usab mapauswag ang kahusayan sa trabaho.

Figure 2. Ang flash chromatogram sa krudo nga kinuha gikan sa Taxus.

Figure 3. Ang pagtandi sa manual chromatography nga pamaagi sa automatic purification method.
Sa konklusyon, ang pagsuklay sa SepaFlash C18 RP flash cartridges sa SepaBean™ machine makahatag og paspas ug episyente nga solusyon alang sa paspas nga pagputli sa natural nga mga produkto sama sa Taxus extract.
Mga pakisayran

1. Alushin GM, Lander GC, Kellogg EH, Zhang R, Baker D ug Nogales E. Ang mga istruktura sa high-resolution nga microtubule nagpadayag sa mga transisyon sa estruktura sa αβ-tubulin sa GTP hydrolysis.Cell, 2014, 157 (5), 1117-1129.
2. Burkhart CA, Berman JW, Swindell CS ug Horwitz SB.Relasyon tali sa Structure sa Taxol ug Ubang Taxane sa Induction sa Tumor Necrosis Factor-α Gene Expression ug Cytotoxicity.Pagpanukiduki sa Kanser, 1994, 54 (22), 5779-5782.
3. Park SJ, Wu CH, Gordon JD, Zhong X, Emami A ug Safa AR.Ang Taxol Nag-aghat sa Caspase-10-dependent nga Apoptosis, J. Biol.Chem., 2004, 279, 51057-51067.
4. Paclitaxel.Ang American Society of Health-System Pharmacists.[Enero 2, 2015]
5. Bruce Ganem ug Roland R. Franke.Paclitaxel gikan sa Primary Taxanes: Usa ka Panglantaw sa Creative Invention sa Organozirconium Chemistry.J. Org.Chem., 2007, 72 (11), 3981-3987.

Mahitungod sa SepaFlash C18 RP flash cartridges

Adunay usa ka serye sa SepaFlash C18 RP flash cartridges nga adunay lain-laing mga detalye gikan sa Santai Technology (sama sa gipakita sa Table 2).

Numero sa butang

Gidak-on sa Kolum

Rate sa Pag-agos

(mL/min)

Max.Presyur

(psi/bar)

SW-5222-004-SP

5.4 g

5-15

400/27.5

SW-5222-012-SP

20 g

10-25

400/27.5

SW-5222-025-SP

33 g

10-25

400/27.5

SW-5222-040-SP

48 g

15-30

400/27.5

SW-5222-080-SP

105 g

25-50

350/24.0

SW-5222-120-SP

155 g

30-60

300/20.7

SW-5222-220-SP

300 g

40-80

300/20.7

SW-5222-330-SP

420 g

40-80

250/17.2

Talaan 2. SepaFlash C18 RP flash cartridges.
Mga materyales sa pag-impake: High-efficiency spherical C18-bonded silica, 20 - 45 μm, 100 Å

Para sa dugang nga impormasyon sa detalyadong mga detalye sa SepaBean™ machine, o ang impormasyon sa pag-order sa SepaFlash series flash cartridges, palihog bisitaha ang among website


Panahon sa pag-post: Sep-20-2018