Bansa Banner

Balita

Ang aplikasyon sa C18AQ Columns sa paglimpyo sa kusgan nga Peptides Peptides

Ang aplikasyon sa C18AQ Columns sa paglimpyo sa kusgan nga Peptides Peptides

Rui huang, bo xu
Application R & D Center

Pasiuna
Ang usa ka peptide usa ka tambalan nga gilangkuban sa mga amino acid, nga ang matag usa adunay talagsaon nga pisikal ug kemikal nga mga kabtangan tungod sa lainlaing mga lahi ug kahusay sa mga residues sa amino acid nga naglangkob sa pagkasunod-sunod niini. Sa pag-uswag sa solidong yugto sa kemikal nga synthesis, ang synthesis nga kemikal sa lainlaing aktibo nga peptides nakahimog dakong pag-uswag. Bisan pa, tungod sa komplikado nga komposisyon sa Peppine nga nakuha pinaagi sa solidong yugto sa Synthesis, ang katapusang produkto kinahanglan nga limpyohan sa kasaligan nga mga pamaagi sa panagbulag. Ang sagad nga gigamit nga mga pamaagi sa paglimpiyo alang sa peptides naglakip sa ion exchange chromatography (IEC) nga pag-ayo sa mga gamay nga molekula sa Medifulation (MW. Ni Santai Technologies, diin ang usa ka cartridge sa Sepreslas sa C18 gigamit alang sa paspas nga paglimpyo sa thormopentin (TP-5) ug ang Target nga Tigum sa Produkto nga nakuha.

Hulagway 1. 20 Kinaandan nga amino acid (Gi-kopya gikan sa www.bachem.com).

Adunay 20 nga mga matang sa amino acid nga kasagaran sa komposisyon sa Pepepides. Kini nga mga amino acid mahimong bahinon sa mga mosunud nga mga grupo sumala sa ilang polar ug kabtangan sa acid-base: dili polar (hydrophobic), polar o sukaranan (ingon sa gipakita sa Figure 1). Sa usa ka sunod-sunod nga peptide, kung ang mga amino acid nga naglangkob sa han-ay mao ang kadaghanan sa mga polar (ingon nga gimarkahan sa Pink Color sa Figure 1), seksina, seks Atol sa pamaagi sa paglimpiyo alang sa mga lig-on nga mga sample sa polar peptide pinaagi sa nabag-o nga Phase Chromatography, ang usa ka gipatik nga Phase Phase sa Santai Farming Collums ug ilang mga aplikasyon). Kung itandi sa regular nga C18 nga mga haligi, ang gipaayo nga C18aq Columns labing angay alang sa paglimpyo sa mga lig-on nga polar o hydrophilic nga mga sample. Sa kini nga post, ang usa ka lig-on nga polar peptide gigamit ingon sampol ug gihinloan sa usa ka kolum nga C18AQ. Ingon usa ka sangputanan, ang Tumong sa Target nga Tigum sa Produkto Ang mga kinahanglanon nakuha ug mahimong magamit sa mosunud nga panukiduki ug pag-uswag.

Seksyon sa Pag-eksperimento
Ang sampol nga gigamit sa eksperimento usa ka synthetic peptide, nga maluloton nga gihatag sa usa ka laboratoryo sa kustomer. Ang peptide mga 1 KDA sa MW ug adunay lig-on nga polar tungod sa daghang mga residue sa polar amino acid sa pagkasunud niini. Ang kaputli sa hilaw nga sample mga 80%. Aron maandam ang sample solution, 60 mg puti nga sample nga krudo sa pulbos nga natunaw sa 5 ml purong tubig ug dayon ultrasonicated aron mahimo kini nga usa ka tin-aw nga solusyon. Ang sample nga solusyon unya gi-injection sa kolum sa flash sa usa ka injector. Ang pag-ayo sa pag-setup sa flashimpification gilista sa Talaan 1.

Himan

Sepabeanmakina 2

Tigbarda

12 g seplashllash c18 rp flash cartridge (spherical silica, 20 - 45 μm, 100 Å, pag-order sa Nunber: SW-5222-012-SP)

12 g seprashlash c18aq rp flash flash

Wavelength

254 Nm, 220 Nm

21 nm

Mobile hugna

Solvent A: Tubig

Solvent B: acetonitrile

Rate sa pag-agos

15 ml / min

20 ml / min

Sampol nga pag-load

30 mg

Moraon

Oras (CV)

Solvent B (%)

Oras (min)

Solvent B (%)

0

0

0

4

1.0

0

1.0

4

10.0

6

7.5

18

12.5

6

13.0

18

16.5

10

14.0

22

19.0

41

15.5

22

21.0

41

18.0

38

/

/

20.0

38

22.0

87

29.0

87

Talaan 1. Ang pag-setup sa eksperimento alang sa pagputli sa flash.

Mga sangputanan ug panaghisgot
Aron itandi ang pasundayag sa pagputli alang sa sample sa Polar Phepide tali sa regular nga kolum sa C18 ug C18AQ nga kolum alang sa usa ka regular nga c18 nga kolum alang sa usa ka pagsugod sa flash. Ingon sa gipakita sa Figure 2, tungod sa hydrophobic hugna sa pagkahugno sa C18 nga mga kadena nga gipahinabo sa taas nga tubig nga tubigon, ang sample halos wala mapadayon sa regular nga C18 cartridge ug direkta nga gipadayon sa mobile hugna. Ingon usa ka sangputanan, ang sampol dili epektibo nga gilain ug gihinloan.

Hulagway 2. Ang Flash Chromatogram sa sampol sa usa ka regular nga C18 Cartridge.

Sunod, gigamit namon ang usa ka kolum nga C18AQ alang sa pagputli sa flash sa sampol. Ingon sa gipakita sa Figure 3, epektibo nga gipadayon ang peptide sa kolum ug dayon gipalihok. Ang target nga produkto gibulag gikan sa mga hugaw sa hilaw nga sample ug nakolekta. Human sa lyophilization ug dayon gisusi sa HPLC, ang nahinlo nga produkto adunay kaputli sa 98.2% ug mahimong dugang nga gigamit alang sa sunod nga lakang sa panukiduki ug pag-uswag.

Hulagway 3. Ang Flash Chomatogram sa sample sa usa ka C18AQ Cartridge.

Sa Konklusyon, ang Sepekto C18aq RP Flash Cartridge gihiusa sa Spy Systemography Systemography Promatography SimpateanAng makina makahatag usa ka paspas ug epektibo nga solusyon alang sa paglimpyo sa kusog nga mga sampol sa polar o hydrophilic.

About sa Sepelflash C18aq RP Flash Cartridges

Adunay usa ka serye sa mga C18aq RP Flash Cartridges nga adunay lainlaing mga detalye gikan sa Santai Teknolohiya (ingon sa gipakita sa Table 2).

Numero sa Item

Gidak-on sa kolum

Rate sa pag-agos

(ml / min)

Max.Pressure

(psi / bar)

SW-5222-004-SP (AQ)

5.4 g

5-15

400 / 27.5

SW-5222-012-SP (AQ)

20 g

10-25

400 / 27.5

SW-5222-025-SP (AQ)

33 g

10-25

400 / 27.5

SW-5222-040-SP (AQ)

48 g

15-30

400 / 27.5

SW-5222-080-SP (AQ)

105 g

25-50

350 / 24.0

SW-5222-120-SP (AQ)

155 g

30-60

300 / 20.7

SW-5222-220-SP (AQ)

300 g

40-80

300 / 20.7

SW-5222-330-SP (AQ)

420 g

40-80

250 / 17.2

Table 2. Sepusflash C18aq RP Flash Cartridges. Mga materyales sa pag-pack: High-Effectianciency Spherical C18 (AQ) -Balded Silica, 20 - 45 μm, 100 Å.

Alang sa dugang nga kasayuran sa detalyado nga mga detalye sa makina sa Sepabean ™, o kasayuran sa pag-order sa serye sa Sepekto sa Sepekto Flash Cartridges, palihug bisitaha ang among website.


Pag-post sa Oras: Okt-12-2018