Hongcheng wang, bo xu
Application R & D Center
Pasiuna
Sumala sa mga paryente nga polarities sa stationary phase ug mobile hugna, ang likido nga chromatography mahimong bahinon sa normal nga yugto sa Chromatography (NPC) ug gibaliktad nga yugto sa Chromatography (RPC). Alang sa RPC, ang polarity sa mobile phase labi ka kusog kaysa sa gipunting nga yugto. Ang RPC nahimo nga labing kaylap nga gigamit sa usa ka modes sa pagbulag sa Chromatography tungod sa taas nga kahusayan niini, maayo nga resolusyon ug tin-aw nga mekanismo sa pagpadayon. Tungod niini ang RPC angay alang sa pagbulag ug paglimpyo sa lainlaing mga compound sa polar o dili-polar, ang mga carboid nga gelics, lakip ang C1INICS, SIPEICS, PEPTIONS, CAROIDS, PEPTIONS, PEPTIONS, PEPTIONS, PEPTIONS, PEPTIONS, PEPTIONS, PEPTIONS, PEPTIONS, PEPTIONS, PEPTIONS, PEPTIONS, CAROIDS, PEPPINES, PEPTIONS, PEPTIONS, CAROIDS, PEPTIONS, PEPTIONS, PEPTIONS, PEPPION SA PROICA NGA GUSTO SA GINTAPOS NGA GUSTO SA PANAHON SA PAGTUON NGA NAGAPANGITA SA MANUM SA PAGTUO Si Phenyl, Cyano, Amino, ug uban pa sa mga bugkos nga gimbuhaton nga gimbuhaton, ang labing kaylap nga gigamit mao ang C18. Gibana-bana nga labaw pa sa 80% sa RPC ang gigamit karon nga Phase sa C18 nga Phase. Tungod niini ang kolum sa C18 Chromatograpiya nahimo nga usa ka kinahanglan nga unibersal nga kolum alang sa matag laboratory.
Bisan kung ang kolum sa C18 mahimong magamit sa usa ka halapad nga mga aplikasyon, bisan pa, alang sa pipila ka mga sample nga labi ka polar o labi ka hydrophilic, regular nga mga haligi sa hydrophilic, regular nga mga haligi sa hydrophilic, regular nga mga haligi sa hydrophilic, regular nga mga haligi sa hydrophilic, regular nga mga haligi sa hydrophilic, regular nga mga haligi sa hydrophilic, regular nga mga haligi sa hydrophilic, regular nga mga haligi sa hydrophilic, regular nga mga haligi sa hydrophilic, regular nga mga haligi sa hydrophilic, regular nga mga haligi sa hydrophilic, regular nga mga kolum sa K18 kung gamiton aron maputli ang mga sample. Sa RPC, ang sagad nga gigamit nga mga solter sa elutundan mahimong i-order sumala sa ilang polar: tubig sa <methonol <achanitrile <tetrulohol Aron masiguro ang maayo nga pagpadayon sa kolum alang sa mga sample (lig-on nga polar o high-hydrophilic), taas nga katimbang sa usa ka mabug-at nga sistema nga magamit ingon ang mobile phase. Bisan pa, kung gigamit ang puro nga sistema sa tubig (lakip ang putli nga tubig o puro nga solusyon sa asin) ingon ang Mobile Phase sa Carbon sa matag usa nga kaparehas sa usa ka phase sa C18 nga kolum Kini nga panghitabo gitawag nga "hydrophobic phase collapse" (ingon sa gipakita sa wala nga bahin sa Figure 1). Bisan kung kini nga kahimtang mabalik kung ang kolum hugasan sa mga organikong solvents sama sa methanol o achonitrile, mahimo pa nga hinungdan sa kadaot sa kolum. Busa, kinahanglan nga mapugngan kini nga kahimtang nga mahitabo.
Hulagway 1
Aron masulbad ang nahisgutan nga mga problema, ang mga materyal nga pag-usab sa Chromatographic Packings naghimo sa mga pag-uswag sa teknikal. Ang usa sa kini nga mga pag-uswag naghimo sa pipila nga mga pagbag-o sa ibabaw sa Silica Matrix, sama sa pagpaila sa mga grupo sa hydrophilic Cyano (ingon sa gipakita sa tuo nga bahin sa Figure 1), aron ipakita ang sulud sa silica gel mas hydrophilic. Sa ingon ang C18 nga kadena sa Silica sa ibabaw mahimong hingpit nga gipalapdan sa ilawom sa mga tubig nga masunson ug ang hydrophobic phase crumpse. Kini nga giusab nga mga kolum nga C18 gitawag nga usa ka C18 nga Kolum sa C18, nga mao ang mga C18aq Columns, nga gidisenyo alang sa labi ka kahimtang sa usa ka labi ka daghan nga sistema. Ang C18AQ Colunns kaylap nga gipadapat sa panagbulag ug paglimpyo sa mga lig-on nga mga compound sa polar, lakip ang mga organikong acid, peptides, nukleyar nga mga bitamina.
Ang pagtinguha usa ka tipikal nga aplikasyon sa C18AQ Columns sa Flash Dutification alang sa mga sampol, nga gikuha ang mga sangkap sa asin o buffer sa sample sa sunud-sunod nga pagtuon. Sa kini nga post, ang maayo nga asul nga FCF nga adunay lig-on nga polar nga gigamit ingon nga sample ug gihinloan sa kolum sa C18AQ. Ang sample nga solvent gipulihan sa organikong lapalapa gikan sa solusyon sa buffer, sa ingon ang pagpadali sa mosunod nga rotary erotary evApioration ingon man sa pagtipig sa mga solvent ug oras sa pag-operate. Dugang pa, ang kaputli sa sampol gipauswag pinaagi sa pagtangtang sa pipila ka mga hugaw sa sampol.
Seksyon sa Pag-eksperimento
Hulagway 2. Ang istruktura sa kemikal sa sampol.
Ang maayo nga asul nga FCF gigamit ingon sampol sa kini nga post. Ang kaputli sa hilaw nga sample mao ang 86% ug ang istruktura sa kemikal sa sample gipakita sa Figure 2 Ang sample nga solusyon unya gi-injection sa kolum sa flash sa usa ka injector. Ang pag-ayo sa pag-setup sa flashimpification gilista sa Talaan 1.
| Himan | Sepabean ™ machine2 | |||
| Tigbarda | 12 g seprashlash c18 rp flash cartridge (spherical silica, 20 - 45 μm, 100 Å, SW-5222-012-SP) | 12 g seprashlash c18aq RP Flash Cartridge (spherical Silica, 20 - 45 μm, 100 Å, SW-5222-012-SP (AQ)) | ||
| Wavelength | 254 nm | |||
| Mobile hugna | Solvent A: Tubig Solvent B: Methanol | |||
| Rate sa pag-agos | 30 ml / min | |||
| Sampol nga pag-load | 300 mg (maayo nga asul nga FCF sa kaputli sa 86%) | |||
| Moraon | Oras (CV) | Solvent B (%) | Oras (CV) | Solvent B (%) |
| 0 | 10 | 0 | 0 | |
| 10 | 10 | 10 | 0 | |
| 10.1 | 100 | 10.1 | 100 | |
| 17.5 | 100 | 17.5 | 100 | |
| 17.6 | 10 | 17.6 | 0 | |
| 22.6 | 10 | 22.6 | 0 | |
Mga sangputanan ug panaghisgot
Usa ka Sepresflash C18aq RP Flash Cartridge gigamit alang sa sample nga pagkaon ug paglimpyo. Ang Lakang sa Lakang Gradoin gigamit diin ang putli nga tubig gigamit ingon ang mobile phase sa pagsugod sa pag-andam ug pagdagan alang sa 10 nga kolum nga kantidad (CV). Ingon sa gipakita sa Figure 3, kung gigamit ang puro nga tubig ingon ang mobile hugna, ang sample hingpit nga gipadayon sa Flash Cartridge. Sunod, ang methanol sa mobile hugna direkta nga nadugangan sa 100% ug ang gradient gipadayon sa 7.5 CV. Ang sampol nagpalayo gikan sa 11.5 hangtod 13.5 CV. Sa mga nakolekta nga mga tipik, ang sample nga solusyon gipulihan gikan sa Nah2po4 buffer solution sa methanol. Ang pagtandi uban ang labi ka maayo nga solusyon, ang methanol labi kadali nga makuha sa rotary nga pag-evaporation sa sunud nga lakang, nga nagpadali sa mosunud nga panukiduki.
Hulagway 3. Ang Flash Chomatogram sa sample sa usa ka C18AQ Cartridge.
Aron itandi ang pagpadayon sa pagpadayon sa C18AQ Cartridge ug regular nga C18 Cartridge alang sa mga sample nga lig-on nga polar, gihimo ang kaamgid nga pagtandi sa pagsulay. Usa ka Sepekto C18 RP Flash Cartrygide gigamit ug ang flash chromatogram alang sa sample gipakita sa Figure 4 Tungod niini ang pagsugod sa gradient gitakda sa 10% nga methanol sa 90% nga tubig. Ingon sa gipakita sa Figure 4, tungod sa pagkahulog sa hydrophobic hugna sa C18 nga mga kadena nga gipahinabo sa taas nga tubigon nga ratio, ang sample halos wala mapadayon sa regular nga C18 cartridge ug direkta nga gipadayon sa mobile hugna. Ingon usa ka sangputanan, ang operasyon sa sample nga pagtangtang o paglimpyo dili makumpleto.
Hulagway 4. Ang Flash Chromatogram sa sampol sa usa ka regular nga C18 Cartridge.
Ang pagtandi sa linear gradient, ang paggamit sa lakang nga gradient adunay mga musunud nga bentaha:
1. Ang pag-inusara nga paggamit ug oras sa pagdagan alang sa sample nga paglimpyo pagkunhod.
2. Ang target nga produkto nga mga elutes sa usa ka mahait nga taluktok, nga nagpamenus sa mga nakolekta nga mga tipik ug sa ingon gipadali ang mosunud nga rotary erotary evapation ingon man ang pagtipig oras.
3. Ang nakolekta nga produkto naa sa methanol nga dali nga mabugnaw, sa ingon ang pag-uga sa oras pagkunhod.
Sa pagtapos, alang sa paglimpyo sa sampol nga kusgan nga polar o labi ka hydrophilic, Sepaplus C18aq RP Flash Carromatography Sycabean Epentace That ug hapsay nga solusyon.
Bahin sa Serima Binhied Series nga C18 RP Flash Cartridges
Adunay usa ka serye sa mga C18aq RP Flash Cartridges nga adunay lainlaing mga detalye gikan sa Santai Teknolohiya (ingon sa gipakita sa Table 2).
| Numero sa Item | Gidak-on sa kolum | Rate sa pag-agos (ml / min) | Max.Pressure (psi / bar) |
| SW-5222-004-SP (AQ) | 5.4 g | 5-15 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-012-SP (AQ) | 20 g | 10-25 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 g | 10-25 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-040-SP (AQ) | 48 g | 15-30 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-080-SP (AQ) | 105 g | 25-50 | 350 / 24.0 |
| SW-5222-120-SP (AQ) | 155 g | 30-60 | 300 / 20.7 |
| SW-5222-220-SP (AQ) | 300 g | 40-80 | 300 / 20.7 |
| SW-5222-330-SP (AQ) | 420 g | 40-80 | 250 / 17.2 |
Table 2. Sepusflash C18aq RP Flash Cartridges.
Mga materyales sa pag-pack: High-Effectianciency Spherical C18 (AQ) -Balded Silica, 20 - 45 μm, 100 Å.
logy (ingon sa gipakita sa Talaan 2).
Post Oras: Aug-27-2018