Rui Huang, Bo Xu
R & D centar za prijavu
Uvođenje
Ionska hromatografija (IEC) je kromatografska metoda koja se obično koristi za odvajanje i pročišćavanje spojeva koji su predstavljeni u jonskom obliku u rješenju. Prema različitim stanjima za nadoknadu izmenljivih jona, IEC se može podijeliti u dvije vrste, razmene kationske hromatografije i hromatografiju aniona. U Chromatografiji za razmenu kationa, kisele grupe se veže na površinu medija za odvajanje. Na primjer, sulfonijska kiselina (-SO3H) je obično korištena grupa u razmeni jake kationske razmjene (SCX), koji disocira H + i negativno nabijeni grupu -SO3- mogu se na taj način adsorbirati ostale katije u rješenju. U anionskoj razmenu hromatografije, alkalne grupe veže se na površinu medija za odvajanje. Na primjer, Quaternary Amine (-nr3oh, gdje je R je ugljikovodička grupa) obično se koristi u jakoj anionskoj razmjeni (SAX), koji disocira oh- i pozitivno nabijene grupu -N + R3 mogu adsorbuti ostale anioni u rješenju, što rezultira efektom aniona.
Među prirodnim proizvodima, flavonoidi su privukli pažnju istraživača zbog svoje uloge u prevenciji i liječenju kardiovaskularnih bolesti. Budući da su molekuli u flavonoidima? U flash hromatografiji, najčešće korišteni mediji za odvajanje za ionsku razmjenu je matrica silikagela u kojoj su ionske razmjene povezane na njenu površinu. Najčešće korišteni ionski modusi u flash kromatografiji su SCX (obično sulfonična grupa kiselina) i SAX (obično kvatrarna amina grupa). U prethodno objavljenoj prijavi sa naslovom "Primjena sepaflash-a jakim kromatografskim kromatografskim stupovima u pročišćavanju alkalnih spojeva" Santai Technologies, SCX stubovi bili su zaposleni za pročišćavanje alkalnih spojeva. U ovom postu, mješavina neutralnog i kiselog standarda korištena je kao uzorak za istraživanje za istraživanje primjene SAX stupaca u pročišćavanju kiselih spojeva.
Eksperimentalni presjek
Slika 1. Shematski dijagram stacionarne faze vezao se na površinu medija za odvajanje SAX-a.
U ovom postu koristi se saksonski stupac koji je prepun kvarternog amina vezanog silicije (kao što je prikazano na slici 1). Kako je korištena mješavina kromona i 2,4-dihidroksibenzinske kiseline koja se pročišćava (kao što je prikazano na slici 2). Smjesa je rastvorena u metanolu i utovaren na flash kertridž od strane injektora. Eksperimentalno postavljanje pročišćavanja bljeska je navedeno u tablici 1.
Slika 2. Hemijska struktura dvije komponente u smjesu uzorka.
| Instrument | Sepabean ™ mašina t | |||||
| Kertridži | 4 g Sepaflash Standardna serija Flash Cartridge (nepravilna silika, 40 - 63 μm, 60 Å, broj narudžbe: S-5101-0004) | 4 g Sepaflash serije Sax Flash Cartridge (nepravilna silika, 40 - 63 μm, 60 Å, broj narudžbe: SW-5001-004-IR) | ||||
| Talasna dužina | 254 nm (detekcija), 280 Nm (nadzor) | |||||
| Mobilna faza | Solvent A: N-heksane | |||||
| Solvent B: Etil acetat | ||||||
| Brzina protoka | 30 ml / min | 20 ml / min | ||||
| Učitavanje utora | 20 mg (mješavina komponente A i komponente B) | |||||
| Gradijent | Vrijeme (CV) | Solvent B (%) | Vrijeme (CV) | Solvent B (%) | ||
| 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
| 3.7 | 12 | / | / | |||
| 16 | 100 | / | / | |||
| 18 | 100 | / | / | |||
Rezultati i diskusija
Prvo, uzorka smjesa bila je odvojena normalnom faznoj flash kertridžom prepunom redovnom silicijum. Kao prikaz na slici 3, dvije komponente u uzorku bile su izgrađene iz uložaka jedna za drugom. Zatim je korištena sax flash kertridža za pročišćavanje uzorka. Kao prikaz na slici 4, kisela komponenta B u potpunosti je zadržana na sax ulošci. Neutralna komponenta A je postepeno elibed iz uložaka sa elucijom mobilne faze.
Slika 3. Flash hromatogram uzorka na redovnom normalnom faznoj ulošci.
Slika 4. Flash hromatogram uzorka na sax ulošku.
Upoređujući sliku 3 i Slika 4, komponenta A ima nedosljedan vršni oblik na dvije različite flatrid flash. Da biste potvrdili da li je vrhunac elucija koji odgovara komponenti, možemo iskoristiti funkciju skeniranja pune talasne dužine koja je ugrađena u upravljački softver Sepabean ™ mašine. Otvorite eksperimentalne podatke od dvije odvojenosti, povucite na liniju indikatora na osobnu osovinu (CV) u kromatogram na najvišu točku i drugu najvišu točku vrha elucije koji odgovaraju komponentu A, a puni valni spektar ove dvije točke automatski će se prikazati ispod kromatograma (kao što je prikazano na slici 5 i slici 6). Upoređujući podatke o celoj valovničkim spektrom ove dvije odvojenosti, komponenta A ima dosljedan apsorpcijski spektar u dva eksperimenta. Iz razloga komponente A ima nedosljedan vršni oblik na dva različita flash kertridža, nagađa se da postoji specifična nečistoća u komponenti A koja ima različite zadržavanje u okviru normalne fazne uloške i saksona. Stoga je slijed za elutiranje različit za komponentu A i nečistoću na ova dva flash kertridža, što rezultira nedosljednim vrhom na kromatogramima.
Slika 5. Potpuni spektar duljine komponente A i nečistoća odvojena normalnim faznim uloškom.
Slika 6. Potpuni spektar talasne dužine komponente A i nečistoća odvojena sax kertridžom.
Ako se ciljni proizvod prikuplja je neutralna komponenta A, zadatak pročišćavanja može se lako ispuniti izravno pomoću SAX kertridža za elug nakon uzoraka uzoraka. S druge strane, ako se ciljni proizvod za sakupljaju je kiseo način za izdanje, sa malim podešavanjem u eksperimentalnim koracima: Kada je uzorak učitan na saksonoj kaseti, a neutralna komponenta A je u potpunosti isključena s normalnim fazom u restauraciju, prebacite mobilnu fazu na otopinu metanola koji sadrže 5% sirtetne kiseline. Acetatni joni u mobilnoj fazi nadmetat će se s komponentom B za obvezujući u kvarterne amine ionske grupe na stacionarnu fazu SAX kertridža, čime se pribavljaju komponentu B iz uloška za dobivanje ciljanog proizvoda. Hromatogram uzorka odvojenog u ionskom načinu razmjene prikazan je na slici 7.
Slika 7. Flash hromatogram komponente B eluirao je u ION Encrazy modu na sax ulošku.
Zaključno, kiseo ili neutralni uzorak mogu se brzo pročistiti sax kertridžom u kombinaciji s normalnim faznim uloškom koji koriste različite strategije pročišćavanja. Nadalje, uz pomoć pune funkcije skeniranja talasnog duljina ugrađena u kontrolni softver Sepabean ™ mašine, karakterističan apsorpcijski spektar iznesenih frakcija mogao bi se lako uporediti i potvrditi, pomažući istraživačima brzo odrediti sastav i čistoću eluiranih frakcija i na taj način poboljšavajući efikasnost rada.
| Broj predmeta | Veličina stupca | Brzina protoka (ml / min) | Max.presure (psi / bar) |
| SW-5001-004-IR | 5,9 g | 10-20 | 400 / 27.5 |
| SW-5001-012-IR | 23 g | 15-30 | 400 / 27.5 |
| SW-5001-025-IR | 38 g | 15-30 | 400 / 27.5 |
| SW-5001-040-IR | 55 g | 20-40 | 400 / 27.5 |
| SW-5001-080-IR | 122 g | 30-60 | 350 / 24.0 |
| SW-5001-120-IR | 180 g | 40-80 | 300 / 20.7 |
| SW-5001-220-IR | 340 g | 50-100 | 300 / 20.7 |
| SW-5001-330-IR | 475 g | 50-100 | 250 / 17.2
|
Tabela 2. Sepaflash serije Sax flash kertridži. Materijali za pakiranje: ultra čisti nepravilni silika saksija, 40 - 63 μm, 60 Å.
Za dodatne informacije o detaljnim specifikacijama Sepabean ™Mašina ili informacije o naručivanju na flash kertridžima Sepaflash Series, posjetite našu web stranicu.
Vrijeme post: nov-09-2018