অ্যাসিডিক যৌগগুলি পরিশোধিতকরণে সেপাফ্ল্যাশ স্ট্রং অ্যানিয়ন এক্সচেঞ্জ ক্রোমাটোগ্রাফি কলামগুলির প্রয়োগ

ফলাফল এবং আলোচনা

প্রথমত, নমুনা মিশ্রণটি নিয়মিত সিলিকার সাথে প্রাক-প্যাকযুক্ত একটি সাধারণ ফেজ ফ্ল্যাশ কার্টরিজ দ্বারা পৃথক করা হয়েছিল। চিত্র 3 -তে শো হিসাবে, নমুনার দুটি উপাদান একের পর এক কার্তুজ থেকে এলিট করা হয়েছিল। এরপরে, একটি স্যাক্স ফ্ল্যাশ কার্টিজ নমুনা পরিশোধিত করার জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল। চিত্র 4 -তে শো হিসাবে, অ্যাসিডিক উপাদান বি সম্পূর্ণরূপে স্যাক্স কার্তুজে ধরে রাখা হয়েছিল। নিরপেক্ষ উপাদান এ ধীরে ধীরে মোবাইল পর্বের এলিউশন সহ কার্টিজ থেকে এলিট করা হয়েছিল।

চিত্র 3। নিয়মিত সাধারণ ফেজ কার্টরিজে নমুনার ফ্ল্যাশ ক্রোমাটোগ্রাম।

চিত্র 4। স্যাক্স কার্তুজে নমুনার ফ্ল্যাশ ক্রোমাটোগ্রাম।
চিত্র 3 এবং চিত্র 4 এর তুলনা করে, উপাদান এ এর ​​দুটি পৃথক ফ্ল্যাশ কার্তুজগুলিতে বেমানান শিখর আকার রয়েছে। এলিউশন শিখরটি উপাদানটির সাথে সম্পর্কিত কিনা তা নিশ্চিত করতে, আমরা সম্পূর্ণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য স্ক্যানিং বৈশিষ্ট্যটি ব্যবহার করতে পারি যা সেপাবিয়ান ™ মেশিনের নিয়ন্ত্রণ সফ্টওয়্যারটিতে নির্মিত। দুটি বিভাজনের পরীক্ষামূলক ডেটা খুলুন, ক্রোমাটোগ্রামে টাইম অক্ষ (সিভি) এ সূচক লাইনে টেনে আনুন সর্বোচ্চ পয়েন্টে এবং উপাদান এ এর ​​সাথে সম্পর্কিত এলিউশন শিখরের দ্বিতীয় সর্বোচ্চ পয়েন্ট এবং এই দুটি পয়েন্টের সম্পূর্ণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য বর্ণালী স্বয়ংক্রিয়ভাবে ক্রোমাটোগ্রামের নীচে দেখানো হবে (চিত্র 5 এবং চিত্র 6 এ দেখানো হয়েছে)। এই দুটি বিভাজনের সম্পূর্ণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য বর্ণালী ডেটার তুলনা করে, উপাদান এ এর ​​দুটি পরীক্ষায় ধারাবাহিক শোষণ বর্ণালী রয়েছে। উপাদান এ এর ​​দুটি পৃথক ফ্ল্যাশ কার্তুজগুলিতে অসামঞ্জস্যপূর্ণ শিখর আকার ধারণ করে, এটি অনুমান করা হয় যে সাধারণ ফেজ কার্টরিজ এবং স্যাক্স কার্টরিজে বিভিন্ন ধারণাটি রয়েছে এমন উপাদান এ -তে নির্দিষ্ট অপরিষ্কার রয়েছে। অতএব, এলিউটিং সিকোয়েন্সটি এ উপাদানগুলির জন্য পৃথক এবং এই দুটি ফ্ল্যাশ কার্তুজগুলিতে অপরিষ্কারতার ফলে ক্রোমাটোগ্রামগুলিতে অসামঞ্জস্যপূর্ণ শিখর আকার রয়েছে।

চিত্র 5। উপাদান এ এর ​​সম্পূর্ণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য বর্ণালী এবং সাধারণ ফেজ কার্টরিজ দ্বারা পৃথক অপরিষ্কার।

চিত্র 6। উপাদান এ এর ​​সম্পূর্ণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য বর্ণালী এবং স্যাক্স কার্তুজ দ্বারা পৃথক অপরিষ্কার।

যদি সংগ্রহ করা লক্ষ্য পণ্যটি নিরপেক্ষ উপাদান এ হয় তবে নমুনা লোডিংয়ের পরে এলিউশনের জন্য সরাসরি স্যাক্স কার্তুজ ব্যবহার করে পরিশোধিত কাজটি সহজেই সম্পন্ন করা যায়। অন্যদিকে, যদি সংগ্রহ করা লক্ষ্য পণ্যটি অ্যাসিডিক উপাদান বি হয়, তবে ক্যাপচার-রিলিজ পদ্ধতিটি পরীক্ষামূলক পদক্ষেপগুলিতে কেবল সামান্য সমন্বয় সহ গ্রহণ করা যেতে পারে: যখন নমুনাটি স্যাক্স কার্টরিজে লোড করা হয়েছিল এবং নিরপেক্ষ উপাদান এ সাধারণ পর্যায়ে জৈব দ্রাবকগুলির সাথে সম্পূর্ণরূপে এলিট করা হয়েছিল, 5% অ্যাসিডযুক্ত মোবাইল সলিউশনে মোবাইল ফেজটি স্যুইচ করা হয়েছিল। মোবাইল পর্যায়ে অ্যাসিটেট আয়নগুলি স্যাক্স কার্টরিজের স্থির পর্যায়ে কোয়ার্টারি অ্যামাইন আয়ন গ্রুপগুলিকে আবদ্ধ করার জন্য উপাদান বি এর সাথে প্রতিযোগিতা করবে, যার ফলে লক্ষ্য পণ্যটি পাওয়ার জন্য কার্টরিজ থেকে উপাদান বি এলিউট করে। আয়ন এক্সচেঞ্জ মোডে পৃথক করা নমুনার ক্রোমাটোগ্রাম চিত্র 7 এ দেখানো হয়েছিল।

চিত্র 7। একটি স্যাক্স কার্টরিজে আয়ন এক্সচেঞ্জ মোডে এলিটেড বি উপাদান বি এর ফ্ল্যাশ ক্রোমাটোগ্রাম।

উপসংহারে, অ্যাসিডিক বা নিরপেক্ষ নমুনাটি বিভিন্ন শুদ্ধকরণ কৌশলগুলি ব্যবহার করে সাধারণ ফেজ কার্টরিজের সাথে মিলিত স্যাক্স কার্তুজ দ্বারা দ্রুত শুদ্ধ করা যেতে পারে। তদ্ব্যতীত, সেপাবিয়ান ™ মেশিনের নিয়ন্ত্রণ সফ্টওয়্যারটিতে অন্তর্নির্মিত পূর্ণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য স্ক্যানিং বৈশিষ্ট্যের সাহায্যে, এলিউটেড ভগ্নাংশগুলির বৈশিষ্ট্যযুক্ত শোষণ বর্ণালী সহজেই তুলনা করা যেতে পারে এবং নিশ্চিত করা যেতে পারে, গবেষকদের দ্রুত এলিউটেড ভগ্নাংশের রচনা এবং বিশুদ্ধতা নির্ধারণ করতে সহায়তা করে এবং এইভাবে কাজের দক্ষতার উন্নতি করতে সহায়তা করে।