
Mingzu Yang, Bo Xu
Приложението за научноизследователска и развойна дейност
Въведение
Антибиотиците са клас вторични метаболити, произведени от микроорганизми (включително бактерии, гъби, актиномицети) или подобни съединения, които са химически синтезирани или полусинтезирани. Антибиотиците могат да инхибират растежа и оцеляването на други микроорганизми. Първият антибиотик, открит от човек, пеницилин, е открит от британския микробиолог Александър Флеминг през 1928 г. Той наблюдава, че бактериите в близост до мухъл не могат да растат в ястието на Staphylococcus Culture, което е замърсено с плесен. Той постулира, че мухълът трябва да секретира антибактериално вещество, което той нарече пеницилин през 1928 г. Въпреки това, активните съставки не са пречистени по това време. През 1939 г. Ernst Chain и Howard Florey от Оксфордския университет решават да развият лекарство, което може да лекува бактериални инфекции. След като се свързват с Флеминг, за да получат щамове, те успешно извличат и пречистиха пеницилин от щамовете. За успешното им развитие на пеницилин като терапевтично лекарство, Флеминг, верига и Флори споделят Нобеловата награда за медицина от 1945 г.
Антибиотиците се използват като антибактериални средства за лечение или предотвратяване на бактериални инфекции. Има няколко основни категории антибиотици, използвани като антибактериални агенти: β-лактамни антибиотици (включително пеницилин, цефалоспорин и др.), Аминогликозидни антибиотици, макролидни антибиотици, тетрациклинови антибиотици, хлорамфеникол (обща синтетичен антибиотик), и т.н. източниците на антибиотици включват биологични антибиотици, антибиотици на тетрациклин, хлорамфеникол (тотален синтетичен антибиотик), и т.н. източниците на антибиотици включват биологични антибиотици, тетрациклинови антибиотици, хлорамфеникол (обща синтетичен антибиотик), и др. Полусинтеза и тотален синтез. Антибиотиците, произведени чрез биологична ферментация, трябва да бъдат структурно модифицирани по химични методи поради химическа стабилност, токсични странични ефекти, антибактериален спектър и други проблеми. След химически модифицирани, антибиотиците могат да постигнат повишена стабилност, да намалят токсичните странични ефекти, да разширят антибактериалния спектър, да намалят резистентността на лекарството, да подобрят бионаличността и по този начин да подобрят ефекта от лечението на лекарството. Следователно, полусинтетичните антибиотици в момента са най-популярната посока в развитието на антибиотични лекарства.
При разработването на полусинтетични антибиотици антибиотиците имат свойствата на ниска чистота, много странични продукти и сложни компоненти, тъй като те са получени от микробни ферментационни продукти. В този случай анализът и контролът на примесите в полусинтетичните антибиотици е особено важен. За да се идентифицират и характеризират ефективно примесите, е необходимо да се получи достатъчно количество примеси от синтетичния продукт на полусинтетичните антибиотици. Сред често използваните техники за приготвяне на примеси, флаш хроматографията е рентабилен метод с предимства като голямо количество зареждане на проби, ниска цена, спестяване на време и др. Флаш хроматографията е все по-използвана от синтетичните изследователи.
В този пост основният примес на полусинтетичен аминогликозиден антибиотик е използван като пробата и пречистена от сейффлаш C18AQ касета, комбинирана със системата на флаш хроматографската система Sepabean ™. Целевият продукт, отговарящ на изискванията, беше успешно получено, което предполага високоефективно решение за пречистване на тези съединения.
Експериментален раздел
Пробата беше любезно предоставена от местна фармацевтична компания. Пробата е вид амино полициклични въглехидрати и молекулната му структура е подобна на антибиотиците на аминогликозид. Полярността на пробата беше доста висока, което я прави много разтворим във вода. Схематичната схема на молекулната структура на пробата е показана на фигура 1. Чистотата на суровата проба е била около 88%, както е анализирана от HPLC. За пречистване на тези съединения с висока полярност пробата едва ли ще бъде запазена в редовните колони C18 според предишния ни опит. Следователно за пречистването на пробата е използвана колона C18AQ.
Фигура 1. Схематичната диаграма на молекулната структура на пробата.
За приготвяне на разтвора на пробата, 50 mg сурова проба се разтваря в 5 ml чиста вода и след това се ултразвук, за да се превърне в напълно ясен разтвор. След това разтворът на пробата се инжектира в колоната на флаш чрез инжектор. Експерименталната настройка на пречистването на светкавицата е посочена в таблицата 1.
Инструмент | SEPABEAN ™ Машина 2 | |
Патрони | 12 g Sepaflash C18AQ RP флаш касета (сферичен силициев диоксид, 20-45 μm, 100 Å, номер на поръчка: SW-5222-012-SP (aq)) | |
Дължина на вълната | 204 nm, 220 nm | |
Мобилна фаза | Разтворител А: Вода Разтворител В: Ацетонитрил | |
Дебит | 15 ml/min | |
Зареждане на пробата | 50 mg | |
Градиент | Време (мин) | Разтворител В (%) |
0 | 0 | |
19.0 | 8 | |
47.0 | 80 | |
52.0 | 80 |
Резултати и дискусия
Флаг хроматограмата на пробата на касетата C18AQ е показана на фигура 2. Както е показано на фигура 2, силно полярната проба е ефективно запазена върху касетата C18AQ. След лифолизиране на събраните фракции, целевият продукт има чистота 96,2% (както е показано на фигура 3) чрез HPLC анализ. Резултатите показват, че пречистеният продукт може да бъде допълнително използван в следващото изследване и разработки на стъпка.
Фигура 2. Флаш хроматограмата на пробата върху касета C18AQ.
Фигура 3. Хроматограмата на HPLC на целевия продукт.
В заключение, флаш касетата на Sepaflash C18AQ RP, комбинирана със системата за флаш хроматография Sepabean ™, може да предложи бързо и ефективно решение за пречистване на високо полярни проби.
За флаш касетите Sepaflash C18AQ RP
Има поредица от флаш касетите на Sepaflash C18AQ RP с различни спецификации от технологията Santai (както е показано в таблица 2).
Номер на артикула | Размер на колоната | Дебит (ml/min) | Max.Pressure (psi/bar) |
SW-5222-004-SP (aq) | 5.4 g | 5-15 | 400/27.5 |
SW-5222-012-SP (aq) | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
SW-5222-025-SP (aq) | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
SW-5222-040-SP (aq) | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
SW-5222-080-SP (aq) | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
SW-5222-120-SP (aq) | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
SW-5222-220-SP (aq) | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
SW-5222-330-SP (aq) | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
Таблица 2. Sepaflash C18AQ RP флаш касети. Опаковъчни материали: Сферична сферична С18 (AQ) силициев диоксид, 20-45 μm, 100 Å.
За допълнителна информация относно подробни спецификации на Machine Sepabean ™ или информацията за поръчка на флаш касети от серия Sepaflash, моля, посетете нашия уебсайт.
Време за публикация: октомври-26-2018