Meiyuan Qian, Yuefeng Tan, Bo Xu
Tətbiq Ar-Ge Mərkəzi
Giriş
Taxus (Taxus chinensis və ya Çin yew) ölkə tərəfindən qorunan yabanı bitkidir.Dördüncü dövr buzlaqlarının tərk etdiyi nadir və nəsli kəsilməkdə olan bir bitkidir.O, həm də dünyada yeganə təbii dərman bitkisidir.Taxus, şimal yarımkürəsinin mülayim zonasında orta subtropik bölgəyə qədər yayılmışdır, dünyada təxminən 11 növ.Çində 4 növ və 1 növ var, yəni Şimal-Şərqi Taxus, Yunnan Taxus, Taxus, Tibet Taxus və Southern Taxus.Bu beş növ Cənub-Qərbi Çin, Cənubi Çin, Mərkəzi Çin, Şərqi Çin, Şimal-Qərbi Çin, Şimal-Şərqi Çin və Tayvanda yayılmışdır.Taxus bitkilərinin tərkibində taksanlar, flavonoidlər, lignanlar, steroidlər, fenolik turşular, sesquiterpenlər və qlikozidlər də daxil olmaqla müxtəlif kimyəvi komponentlər var.Məşhur şiş əleyhinə dərman Taxol (və ya Paklitaksel) bir növ taksandır.Taxol unikal xərçəng əleyhinə mexanizmlərə malikdir.Taxol mikrotubulları onlarla darayaraq "dondura" bilər və hüceyrə bölünməsi zamanı mikrotubulların xromosomları ayırmasının qarşısını ala bilər, beləliklə, bölünən hüceyrələrin, xüsusən də sürətlə çoxalan xərçəng hüceyrələrinin ölümünə səbəb olur[1].Bundan əlavə, makrofaqları aktivləşdirərək, Taxol TNF-α (şiş nekrozu faktoru) reseptorlarının azalmasına və TNF-α-nın sərbəst buraxılmasına səbəb olur, bununla da şiş hüceyrələrini öldürür və ya inhibə edir[2].Bundan əlavə, Taxol Fas/FasL vasitəçiliyi ilə apoptotik reseptor yolunda hərəkət edərək və ya sistein proteaz sistemini aktivləşdirərək apoptoza səbəb ola bilər [3].Çoxsaylı antikanser təsirinə görə Taxol yumurtalıq xərçəngi, döş xərçəngi, kiçik hüceyrəli olmayan ağciyər xərçəngi (KHDAK), mədə xərçəngi, yemək borusu xərçəngi, sidik kisəsi xərçəngi, prostat xərçəngi, bədxassəli melanoma, baş və boyun xərçənginin müalicəsində geniş istifadə olunur. xərçəng və s.[4].Xüsusilə inkişaf etmiş döş xərçəngi və irəliləmiş yumurtalıq xərçəngi üçün Taxol əla müalicəvi təsirə malikdir, buna görə də o, “xərçəngin müalicəsi üçün son müdafiə xətti” kimi tanınır.
Taxol son illərdə beynəlxalq bazarda ən məşhur xərçəng əleyhinə dərmandır və yaxın 20 ildə insanlar üçün ən təsirli xərçəng əleyhinə dərmanlardan biri hesab olunur.Son illərdə əhalinin və xərçəng xəstəliyinin kəskin artması ilə Taxola tələbat da xeyli artmışdır.Hazırda klinik və ya elmi tədqiqatlar üçün tələb olunan Taxol əsasən birbaşa Taxus-dan çıxarılır.Təəssüf ki, bitkilərdə Taxolun tərkibi kifayət qədər aşağıdır.Məsələn, Taxus brevifolia qabığında Taxol tərkibi cəmi 0,069% təşkil edir ki, bu da ümumiyyətlə ən yüksək tərkibə malik hesab olunur.1 q Taxolun çıxarılması üçün təxminən 13,6 kq Taxus qabığı lazımdır.Bu hesablamaya əsasən, yumurtalıq xərçəngi xəstəsini müalicə etmək üçün yaşı 100-dən çox olan 3-12 Taxus ağacı lazımdır.Nəticədə çoxlu sayda Taxus ağacı kəsilib və nəticədə bu qiymətli növün nəsli kəsilib.Bundan əlavə, Taxus resurs baxımından çox zəifdir və artım yavaşdır, bu da Taxol-un gələcək inkişafı və istifadəsini çətinləşdirir.
Hazırda Taxolun total sintezi uğurla başa çatıb.Bununla belə, onun sintetik marşrutu çox mürəkkəb və yüksək qiymətə malikdir, buna görə də sənaye əhəmiyyəti yoxdur.Taxolun yarı sintetik üsulu hazırda nisbətən yetkinləşib və süni əkinlə yanaşı, Taxol mənbəyini genişləndirmək üçün effektiv üsul hesab olunur.Qısaca olaraq, Taxolun yarı sintezində Taxus bitkilərində nisbətən bol olan Taxol prekursor birləşməsi çıxarılır və sonra kimyəvi sintez yolu ilə Taxola çevrilir.Taxus baccata iynələrində 10-deasetilbakatinin Ⅲ tərkibi 0,1%-ə qədər ola bilər.Və iynələr qabıqlarla müqayisədə bərpa etmək asandır.Buna görə də, 10-deasetilbakatin Ⅲ əsasında Taxolun yarı sintezi tədqiqatçıların[5] diqqətini daha çox cəlb edir (Şəkil 1-də göstərildiyi kimi).
Şəkil 1. 10-deasetilbakatin Ⅲ əsasında Taxolun yarı sintetik yolu.
Bu yazıda Taxus bitki ekstraktı, Santai Technologies tərəfindən istehsal olunan SepaFlash C18 tərs fazalı (RP) flaş kartricləri ilə birlikdə flaş hazırlıqlı maye xromatoqrafiya sistemi SepaBean™ maşını ilə təmizlənmişdir.Təmizlik tələblərinə cavab verən hədəf məhsul əldə edilib və sonrakı elmi tədqiqatlarda istifadə oluna bilər, bu növ təbii məhsulların sürətli təmizlənməsi üçün sərfəli həll təklif edir.
| Alət | SepaBean™ maşını | |
| Patron | 12 q SepaFlash C18 RP flaş kartric (sferik silisium, 20 - 45μm, 100 Å, Sifariş nömrəsi: SW-5222-012-SP) | |
| Dalğa uzunluğu | 254 nm (aşkar), 280 nm (monitorinq) | |
| Mobil mərhələ | Həlledici A: Su | |
| Həlledici B: Metanol | ||
| Axın | 15 ml/dəq | |
| Nümunə yüklənməsi | 20 mq xam nümunə 1 ml DMSO-da həll edilir | |
| Qradient | Vaxt (dəq) | Həlledici B (%) |
| 0 | 10 | |
| 5 | 10 | |
| 7 | 28 | |
| 14 | 28 | |
| 16 | 40 | |
| 20 | 60 | |
| 27 | 60 | |
| 30 | 72 | |
| 40 | 72 | |
| 43 | 100 | |
| 45 | 100 | |
Nəticələr və Müzakirə
Taxus-dan xam ekstrakt üçün flaş xromatoqramma Şəkil 2-də göstərilmişdir. Xromatoqramı təhlil edərək, hədəf məhsul və çirkləri əsas ayırma əldə etmişdir.Bundan əlavə, yaxşı reproduktivlik çoxsaylı nümunə inyeksiyaları ilə də həyata keçirilmişdir (məlumatlar göstərilmir).Şüşə sütunlarla əl ilə xromatoqrafiya üsulu ilə ayırmağı başa çatdırmaq üçün təxminən 4 saat vaxt lazımdır.Ənənəvi əl xromatoqrafiya üsulu ilə müqayisə etsək, bu yazıdakı avtomatik təmizləmə metodu bütün təmizləmə tapşırığını tamamlamaq üçün cəmi 44 dəqiqə tələb edir (Şəkil 3-də göstərildiyi kimi).Avtomatik üsulla vaxtın 80% -dən çoxu və çox miqdarda həlledici qənaət edilə bilər ki, bu da maya dəyərini effektiv şəkildə azalda və işin səmərəliliyini əhəmiyyətli dərəcədə yaxşılaşdıra bilər.
Şəkil 2. Taxus-dan xam ekstraktın flaş xromatoqramı.
Şəkil 3. Əl xromatoqrafiya metodunun avtomatik təmizləmə üsulu ilə müqayisəsi.
Yekun olaraq, SepaFlash C18 RP flaş kartriclərini SepaBean™ maşını ilə darayaraq Taxus ekstraktı kimi təbii məhsulların sürətli təmizlənməsi üçün sürətli və səmərəli həll təklif edə bilər.
İstinadlar
1. Alushin GM, Lander GC, Kellogg EH, Zhang R, Baker D və Nogales E. Yüksək rezolyusiyaya malik mikrotubul strukturları GTP hidrolizindən sonra αβ-tubulində struktur keçidləri aşkar edir.Hüceyrə, 2014, 157 (5), 1117-1129.
2. Burkhart CA, Berman JW, Swindell CS və Horwitz SB.Taxol və digər taksanların strukturu arasında şiş nekroz faktoru-α gen ifadəsinin və sitotoksikliyin induksiyası ilə əlaqəsi.Xərçəng Araşdırması, 1994, 54 (22), 5779-5782.
3. Park SJ, Wu CH, Gordon JD, Zhong X, Emami A və Safa AR.Taxol Caspase-10-dan asılı apoptozu yaradır, J. Biol.Chem., 2004, 279, 51057-51067.
4. Paklitaksel.Amerika Sağlamlıq Sistemi Əczaçıları Cəmiyyəti.[2 yanvar 2015]
5. Bruce Ganem və Roland R. Franke.İlkin Taksanlardan Paklitaksel: Organozirkonium Kimyasında Yaradıcı İxtiraya Perspektiv.J. Org.Chem., 2007, 72 (11), 3981-3987.
Santai Texnologiyasından fərqli spesifikasiyalara malik SepaFlash C18 RP fleş kartricləri seriyası mövcuddur (Cədvəl 2-də göstərildiyi kimi).
| Maddə nömrəsi | Sütun Ölçüsü | Axın (ml/dəq) | Maks.Təzyiq (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP | 5,4 q | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP | 20 q | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP | 33 q | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP | 48 q | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP | 105 q | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP | 155 q | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP | 300 q | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP | 420 q | 40-80 | 250/17.2 |
Cədvəl 2. SepaFlash C18 RP flaş kartricləri.
Qablaşdırma materialları: Yüksək effektiv sferik C18 ilə birləşdirilmiş silisium, 20 - 45 μm, 100 Å
SepaBean™ maşınının ətraflı spesifikasiyası və ya SepaFlash seriyası flaş kartricləri haqqında sifariş məlumatı haqqında əlavə məlumat üçün vebsaytımıza daxil olun.
Göndərmə vaxtı: 20 sentyabr 2018-ci il