Mingzu Yang, Bo Xu
Tətbiq Ar-Ge Mərkəzi
Giriş
Antibiotiklər mikroorqanizmlər (bakteriyalar, göbələklər, aktinomisetlər daxil olmaqla) və ya kimyəvi cəhətdən sintez edilmiş və ya yarı sintez edilmiş oxşar birləşmələr tərəfindən istehsal olunan ikincil metabolitlər sinfidir.Antibiotiklər digər mikroorqanizmlərin böyüməsini və sağ qalmasını maneə törədə bilər.İnsan tərəfindən kəşf edilən ilk antibiotik olan penisilin 1928-ci ildə ingilis mikrobioloqu Alexander Fleming tərəfindən kəşf edilmişdir. O, kiflə çirklənmiş stafilokokk kulturası qabında kif yaxınlığındakı bakteriyaların çoxalmadığını müşahidə etmişdir.O, qəlibin 1928-ci ildə penisilin adlandırdığı antibakterial maddə ifraz etməli olduğunu irəli sürdü. Lakin o zaman aktiv maddələr təmizlənməmişdi.1939-cu ildə Oksford Universitetindən Ernst Chain və Howard Florey bakterial infeksiyaları müalicə edə biləcək bir dərman hazırlamağa qərar verdilər.Ştammlar əldə etmək üçün Fleming ilə əlaqə saxladıqdan sonra, onlar uğurla ştammlardan penisilin çıxarıb təmizlədilər.Penisilinin terapevtik dərman kimi uğurlu inkişafı üçün Fleming, Chain və Florey 1945-ci ildə Tibb üzrə Nobel Mükafatını bölüşdülər.
Antibiotiklər bakterial infeksiyaları müalicə etmək və ya qarşısını almaq üçün antibakterial agent kimi istifadə olunur.Antibakterial agent kimi istifadə olunan bir neçə əsas antibiotik kateqoriyası var: β-laktam antibiotikləri (o cümlədən penisilin, sefalosporin və s.), aminoqlikozid antibiotikləri, makrolid antibiotiklər, tetrasiklin antibiotikləri, xloramfenikol (ümumi sintetik antibiotiklər) və s. bioloji fermentasiya, yarımsintez və ümumi sintez.Bioloji fermentasiya nəticəsində yaranan antibiotiklər kimyəvi stabillik, zəhərli yan təsirlər, antibakterial spektr və digər məsələlərə görə kimyəvi üsullarla struktur olaraq dəyişdirilməlidir.Kimyəvi modifikasiyadan sonra antibiotiklər sabitliyin artmasına, toksik yan təsirlərin azalmasına, antibakterial spektrin genişlənməsinə, dərmana qarşı müqavimətin azalmasına, bioavailability yaxşılaşmasına və bununla da dərman müalicəsinin effektivliyinə nail ola bilər.Buna görə də yarı sintetik antibiotiklər hazırda antibiotik preparatlarının hazırlanmasında ən populyar istiqamətdir.
Yarımsintetik antibiotiklərin inkişafında antibiotiklər mikrob fermentasiya məhsullarından alındığı üçün aşağı təmizlik, çoxlu yan məhsullar və mürəkkəb komponentlər xassələrinə malikdir.Bu halda, yarı sintetik antibiotiklərdə olan çirklərin təhlili və nəzarəti xüsusilə vacibdir.Çirkləri effektiv müəyyən etmək və xarakterizə etmək üçün yarı sintetik antibiotiklərin sintetik məhsulundan kifayət qədər miqdarda çirkləri almaq lazımdır.Tez-tez istifadə olunan çirklənmənin hazırlanması üsulları arasında flaş xromatoqrafiya böyük nümunə yükləmə miqdarı, aşağı qiymət, vaxta qənaət və s. kimi üstünlükləri ilə qənaətcil bir üsuldur. Flash xromatoqrafiya sintetik tədqiqatçılar tərəfindən getdikcə daha çox istifadə olunur.
Bu yazıda yarı sintetik aminoqlikozid antibiotikinin əsas çirki nümunə kimi istifadə edilib və SepaBean™ flaş xromatoqrafiya sistemi ilə birləşdirilmiş SepaFlash C18AQ kartrici ilə təmizlənib.Tələblərə cavab verən hədəf məhsul uğurla əldə edildi və bu birləşmələrin təmizlənməsi üçün yüksək effektiv həll təklif etdi.
Eksperimental bölmə
Nümunə yerli əczaçılıq şirkəti tərəfindən təqdim edilmişdir.Nümunə bir növ aminopolisiklik karbohidratlar idi və onun molekulyar quruluşu aminoqlikozid antibiotikləri ilə oxşar idi.Nümunənin polaritesi kifayət qədər yüksək idi, bu da onu suda çox həll edir.Nümunənin molekulyar strukturunun sxematik diaqramı Şəkil 1-də göstərilmişdir. HPLC ilə təhlil edilən xam nümunənin təmizliyi təxminən 88% təşkil etmişdir.Yüksək qütblü bu birləşmələrin təmizlənməsi üçün əvvəlki təcrübələrimizə əsasən nümunə normal C18 sütunlarında çətinliklə saxlanıla bilər.Buna görə də, nümunənin təmizlənməsi üçün bir C18AQ sütunu istifadə edilmişdir.
Şəkil 1. Nümunənin molekulyar quruluşunun sxematik diaqramı.
Nümunə məhlulunu hazırlamaq üçün 50 mq xam nümunə 5 mL saf suda həll edildi və sonra tamamilə aydın bir məhlul halına gətirmək üçün ultrasəslə aparıldı.Nümunə məhlulu daha sonra enjektor vasitəsilə flaş sütuna vuruldu.Flaş təmizləyicinin eksperimental quruluşu Cədvəl 1-də verilmişdir.
| Alət | SepaBean™ maşını 2 | |
| Patronlar | 12 q SepaFlash C18AQ RP fleş kartric (sferik silisium, 20 - 45μm, 100 Å, Sifariş nömrəsi: SW-5222-012-SP(AQ)) | |
| Dalğa uzunluğu | 204 nm, 220 nm | |
| Mobil mərhələ | Həlledici A: Su Həlledici B: Asetonitril | |
| Axın | 15 ml/dəq | |
| Nümunə yüklənməsi | 50 mq | |
| Qradient | Vaxt (dəq) | Həlledici B (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47.0 | 80 | |
| 52.0 | 80 | |
Nəticələr və Müzakirə
C18AQ kartricindəki nümunənin flaş xromatoqramı Şəkil 2-də göstərilmişdir. Şəkil 2-də göstərildiyi kimi, yüksək qütblü nümunə C18AQ patronunda effektiv şəkildə saxlanılmışdır.Toplanmış fraksiyalar üçün liofolizasiyadan sonra hədəf məhsul HPLC analizi ilə 96,2% (Şəkil 3-də göstərildiyi kimi) təmizliyə malik olmuşdur.Nəticələr göstərdi ki, təmizlənmiş məhsul növbəti mərhələdə tədqiqat və inkişafda daha da istifadə edilə bilər.
Şəkil 2. C18AQ kartricindəki nümunənin flaş xromatoqramı.
Şəkil 3. Hədəf məhsulun HPLC xromatoqramı.
Yekun olaraq, SepaFlash C18AQ RP fleş kartrici fleş xromatoqrafiya sistemi SepaBean™ maşını ilə birlikdə yüksək qütblü nümunələrin təmizlənməsi üçün sürətli və effektiv həll təklif edə bilər.
SepaFlash C18AQ RP fleş kartricləri haqqında
Santai Texnologiyasından fərqli spesifikasiyalara malik SepaFlash C18AQ RP fleş kartricləri seriyası mövcuddur (Cədvəl 2-də göstərildiyi kimi).
| Maddə nömrəsi | Sütun Ölçüsü | Axın (ml/dəq) | Maks.Təzyiq (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP(AQ) | 5,4 q | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP(AQ) | 20 q | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP(AQ) | 33 q | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP(AQ) | 48 q | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP(AQ) | 105 q | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP(AQ) | 155 q | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP(AQ) | 300 q | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP(AQ) | 420 q | 40-80 | 250/17.2 |
Cədvəl 2. SepaFlash C18AQ RP fleş kartricləri.Qablaşdırma materialları: Yüksək effektiv sferik C18(AQ) ilə bağlanmış silisium, 20 - 45 μm, 100 Å.
SepaBean™ maşınının ətraflı spesifikasiyası və ya SepaFlash seriyası flaş kartricləri haqqında sifariş məlumatı haqqında əlavə məlumat üçün vebsaytımıza daxil olun.
Göndərmə vaxtı: 26 oktyabr 2018-ci il