
Rui huang, bo xu
Tətbiq R & D Mərkəzi
Giriş
İon mübadiləsi xromatoqrafiyası (IEC), həllində ion şəklində təqdim olunan birləşmələri ayırmaq və təmizləmək üçün ümumiyyətlə istifadə olunan bir xromatoqrafik metoddur. Dəyişdirilə bilən ionların fərqli ittihamı vəziyyətinə görə, IEC iki növə, kation mübadiləsi xromatoqrafiyası və anion mübadiləsi xromatoqrafiyasına bölünə bilər. Cation mübadiləsi xromatoqrafiyası, asidik qruplar ayrılma mediasının səthinə bağlanır. Məsələn, sulfonis turşusu (-So3h), H + və mənfi yüklənmiş qrupu bölüşdürən güclü bir kation mübadiləsi (SCX) olan adi bir qrupdur Anion mübadiləsi xromatoqrafiyası, qələvi qruplar ayrılma mediasının səthinə bağlanır. Məsələn, Duaterary Amine (-NR3OH, R 3H-nin olduğu güclü bir anion mübadiləsi (SAX), müsbət yüklənmiş qrupu (SAX) -n + R3-nin həllində başqa bir anion effekti ilə nəticələnə bilər.
Təbii məhsullar arasında, flavonoidlər, kardiovkaların xəstəliklərinin qarşısının alınmasında və müalicəsində rolları səbəbindən tədqiqatçıların diqqətini çəkdi. Flavonoid molekulları, fenolik hidroksil qruplarının olması səbəbindən turşudur, İon mübadiləsi xromatoqrafiyası, bu turşu birləşmələrin ayrılması və təmizlənməsi üçün adi normal mərhələyə və ya geri çevrilmiş faza xromatoqrafiyasına əlavə olaraq alternativ bir seçimdir. Flash xromatoqrafiyada ion mübadiləsi üçün çox istifadə ayrılıq mediası, ion mübadilə qruplarının səthinə bağlandıqları silisium gel matrixdir. Flash xromatoqrafiyasında ən çox istifadə olunan ion mübadilə rejimləri SCX (adətən sulfonis turşusu qrupu) və Sax (adətən dördlü bir amin qrupu). Əvvəlcədən dərc olunan tətbiq notasında "Sepaflash güclü kational kationların tətbiqi ilə tətbiqi" qələvi texnologiyaların təmizlənməsi ilə tətbiqi, qələvi birləşmələrin təmizlənməsi üçün SCX sütunları istifadə olunur. Bu yazıda, neytral və turşu standartlarının qarışığı, SAX sütunlarının tətbiqi turşu birləşmələrinin təmizlənməsində araşdırmağı araşdırmaq üçün nümunə olaraq istifadə edilmişdir.
Eksperimental bölmə
Şəkil 1. Sax Ayrılıq Mediasının səthinə bağlanmış stasionar fazanın sxematik diaqramı.
Bu yazıda, dördüncü səkilərlə əvvəlcədən dolu bir Sax bir sütun istifadə edildi (Şəkil 1-də göstərildiyi kimi) istifadə edildi. Xromon və 2,4-dihydroxybenzoik turşu qarışığı, nümunənin təmizlənməsi üçün istifadə edildi (Şəkil 2-də göstərildiyi kimi). Qarışıq metanolda həll edildi və bir enjektor tərəfindən flash patron üzərinə yükləndi. Flash təmizliyinin eksperimental quruluşu cədvəl 1-də verilmişdir.
Şəkil 2. Nümunə qarışığındakı iki komponentin kimyəvi quruluşu.
Alət | Sepabean ™ maşın t | |||||
Patron | 4 G Sepaflash Standard Series Flash patron (nizamsız silisium, 40 - 63 mkm, 60 å, sifariş nömrəsi: S-5101-0004) | 4 G Sepaflash bağlanmış Series SERS SAX Flash patron (nizamsız silisium, 40 - 63 mkm, 60 å, sifariş nömrəsi: SW-5001-004-IR) | ||||
Dalğa uzunluğu | 254 nm (aşkarlama), 280 nm (monitorinq) | |||||
Mobil faza | Solvent A: n-heksan | |||||
Solvent b: etil asetat | ||||||
Axın | 30 ml / dəq | 20 ml / dəq | ||||
Nümunə yükləmə | 20 mq (bir komponent və komponentin bir qarışığı) | |||||
Gradient | Zaman (CV) | Solvent b (%) | Zaman (CV) | Solvent b (%) | ||
0 | 0 | 0 | 0 | |||
1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
3.7 | 12 | / | / | |||
16 | 100 | / | / | |||
18 | 100 | / | / |
Nəticələr və müzakirə
Əvvəlcə nümunə qarışığı adi silisium ilə əvvəlcədən dolu normal bir faza flash patron ilə ayrıldı. Şəkil 3-də şou olaraq nümunə olan iki komponent, bir-birinin ardınca patrondan təmizləndi. Sonrakı, bir SAX flash patron, nümunənin təmizlənməsi üçün istifadə edildi. Şəkil 4-də göstərən kimi, B turşusu komponenti B-nin Sax patronunda tamamilə saxlanıldı. Neytral komponent A Cib fazasının yaranması ilə patrondan tədricən işıqlandırıldı.
Şəkil 3. Nümunənin flaş xromatogramı adi normal bir faza patronunda.
Şəkil 4. Bir SAX patronunda nümunənin flaş xromatogramı.
Şəkil 3 və Şəkil 4-ü müqayisə edərək, iki fərqli flaş patronda uyğun olmayan komponentin uyğunsuz pik şəklindədir. Etibarlı zirvəsinin komponentə uyğun olub olmadığını təsdiqləmək üçün Sepabean ™ maşınının idarəetmə proqramı quraşdırılmış tam dalğa uzunluğunun tarama xüsusiyyətindən istifadə edə bilərik. İki ayırın eksperimental məlumatlarını açın, xromatoqramda ən yüksək nöqtəyə və bu iki nöqtənin tam dalğa uzunluğunun spektrində xromatogramın ən yüksək nöqtəsinə (Şəkil 5 və Şəkil 6-da göstərildiyi kimi avtomatik olaraq göstəriləcəkdir. Bu iki ayrılmanın tam dalğa uzunluğunun spektrinin məlumatlarını müqayisə edərək, iki təcrübədə ardıcıl udma spektrinə malikdir. Komponentin səbəbi ilə iki fərqli flaş patronda uyğun olmayan pik forması var, bu, normal faza patronu və Sax patronunda fərqli tutma olan komponentdə konkret çirklərin olması ehtiramdır. Buna görə, əlil ardıcıllığı bir komponent və bu iki flaş patrondakı çirk üçün fərqlidir, nəticədə xromatoqramlarda uyğun olmayan pik forma yaranır.
Şəkil 5. A komponentinin tam dalğa uzunluğu spektri və normal faza patronu ilə ayrılmış çirk.
Şəkil 6. Komponentin tam dalğa uzunluğu spektri A və Sax patron tərəfindən ayrılmış çirk.
Toplanacaq hədəf məhsulu bir neytral komponentdirsə, təmizləyici iş, nümunə yükləndikdən sonra sax patronundan istifadə edərək birbaşa SAX patronundan istifadə edərək asanlıqla tamamlana bilər. Digər tərəfdən, hədəf məhsulu B -j turşusu komponentidirsə, Təcrübə-buraxılış tərzi, təcrübi addımlarda yalnız bir az düzəlişlə qəbul edilə bilər. Mobil fazadakı asetat ionları, SAX patronunun stasionar fazasında, bununla da hədəf məhsulu əldə etmək üçün patrondan olan komponentin tərkibində olan SAX patronun tərkibində olan komponentin komponenti ilə rəqabət aparacaqdır. İon mübadilə rejimində ayrılmış nümunənin xromatogramı Şəkil 7-də göstərilmişdir.
Şəkil 7. Bir SAX patronunda ion mübadilə rejimində b olan Flash xromatogramı.
Sonda turşu və ya neytral nümunə, müxtəlif təmizlik strategiyalarından istifadə edərək normal faza patronu ilə birləşdirilmiş Sax Kartrici ilə sürətlə təmizlənə bilər. Bundan əlavə, Sepabean ™ maşınının idarəetmə proqramına quraşdırılmış tam dalğa uzunluğu tarama xüsusiyyətinin köməyi ilə, ellənmiş fraksiyaların xarakterik udma spektri asanlıqla müqayisə oluna və təsdiqlənə bilər, tədqiqatçılar tez bir zamanda ellənmiş fraksiyaların tərkibini və saflığını müəyyənləşdirməyə və bununla da iş səmərəliliyini yaxşılaşdırmağa kömək edə bilər.
Maddə nömrəsi | Sütun ölçüsü | Axın (ml / dəq) | Max.Pressure (Psi / bar) |
SW-5001-004-IR | 5.9 g | 10-20 | 400/27.5 |
SW-5001-012-IR | 23 g | 15-30 | 400/27.5 |
SW-5001-025-IR | 38 g | 15-30 | 400/27.5 |
SW-5001-040-IR | 55 g | 20-40 | 400/27.5 |
SW-5001-080-IR | 122 g | 30-60 | 350 / 24.0 |
SW-5001-120-IR | 180 g | 40-80 | 300/20.7 |
SW-5001-220-IR | 340 g | 50-100 | 300/20.7 |
SW-5001-330-IR | 475 g | 50-100 | 250/12.2
|
Cədvəl 2. Sepaflash bağlanmış seriyalar Sax flash patronları. Qablaşdırma materialları: ultra təmiz nizamsız Saxla bağlanmış silisium, 40 - 63 mkm, 60 å.
Sepabean ™ ətraflı xüsusiyyətləri haqqında əlavə məlumat üçünMaşın və ya Sepaflash seriyası flash patronları haqqında sifariş məlumatı, veb saytımıza daxil olun.
Time vaxt: Nov-09-2018