لافتة الأخبار

أخبار

تنقية مستخلص Taxus بواسطة جهاز Sepabean ™

استخراج الضرائب

Meiyuan Qian ، Yuefeng Tan ، Bo Xu
تطبيق R&D Center

مقدمة
Taxus (Taxus Chinensis أو صينية Yew) هو مصنع بري محمي من قبل البلاد. إنه نبات نادر ومهدز بالانقراض خلفته الأنهار الجليدية الرباعية. إنه أيضًا النبات الطبي الطبيعي الوحيد في العالم. يتم توزيع Taxus في المنطقة المعتدلة في نصف الكرة الشمالي إلى المنطقة المتوسطة الاستوائية ، مع حوالي 11 نوعًا في العالم. هناك 4 أنواع وتنوع واحد في الصين ، وهي Taxus في الشمال الشرقي ، و Yunnan Taxus ، و Taxus ، و Tabitan Taxus و Southern Taxus. يتم توزيع هذه الأنواع الخمسة في جنوب غرب الصين ، جنوب الصين ، وسط الصين ، شرق الصين ، شمال غرب الصين ، شمال شرق الصين وتايوان. تحتوي نباتات Taxus على مجموعة واسعة من المكونات الكيميائية ، بما في ذلك التاكسيات ، والفلافونويد ، واللجينات ، والمنشطات ، والأحماض الفينولية ، والسيسكويتربينيس والجليكوسيدات. يعد Taxol (أو باكليتاكسيل) الشهير المضاد للورم (أو باكليتاكسيل) نوعًا من التاكسيات. Taxol لديها آليات مضادة للسرطان فريدة من نوعها. يمكن أن "تجميد" Taxol "تجميد" الأنابيب الدقيقة عن طريق تمشيطها معها ومنع الأنابيب الدقيقة من فصل الكروموسومات في وقت انقسام الخلايا ، مما يؤدي إلى وفاة الخلايا القسرية ، وخاصة الخلايا السرطانية المتناثرة بسرعة [1]. علاوة على ذلك ، من خلال تنشيط الضامة ، يتسبب الضرائب في انخفاض في مستقبلات TNF-α (عامل نخر الورم) وإطلاق TNF-α ، وبالتالي قتل أو تثبيط الخلايا السرطانية [2]. علاوة على ذلك ، يمكن أن تحفز الضازيات موت الخلايا المبرمج عن طريق العمل على مسار مستقبلات موت الخلايا المبرمج بوساطة FAS/FASL أو تنشيط نظام البروتيني السيستين [3]. نظرًا لتأثيرها المضاد للسرطان المستهدف المتعدد ، يستخدم الضازيون على نطاق واسع في علاج سرطان المبيض ، وسرطان الثدي ، وسرطان الرئة غير المتساوي (NSCLC) ، وسرطان المعدة ، وسرطان المريء ، وسرطان المثانة ، وسرطان البروستاتا ، وسرطان الميلانوما الخبيث ، وسرطان الرأس والرقبة ، إلخ [4]. لا سيما بالنسبة لسرطان الثدي المتقدم وسرطان المبيض المتقدم ، فإن Taxol له تأثير علاجي متميز ، وبالتالي يُعرف باسم "خط الدفاع الأخير لعلاج السرطان".

Taxol هي الأدوية الأكثر شعبية مضادات للسرطان في السوق الدولية في السنوات الأخيرة ، وتعتبر واحدة من أكثر الأدوية المضادة للسرطان فعالية بالنسبة للبشر في العشرين عامًا القادمة. في السنوات الأخيرة ، مع النمو المتفجر للسكان وحدوث السرطان ، زاد الطلب على الضرائب أيضًا بشكل كبير. حاليًا ، يتم استخراج Taxol المطلوب للبحث السريري أو العلمي بشكل أساسي مباشرة من Taxus. لسوء الحظ ، فإن محتوى Taxol في النباتات منخفض للغاية. على سبيل المثال ، يبلغ محتوى Taxol 0.069 ٪ فقط في لحاء Taxus Brevifolia ، والذي يعتبر عمومًا أعلى محتوى. لاستخراج 1 غرام من Taxol ، يتطلب حوالي 13.6 كجم من لحاء Taxus. بناءً على هذا التقدير ، يستغرق الأمر من 3 إلى 12 شجرة ضرائب تزيد عن 100 عام لعلاج مريض سرطان المبيض. نتيجة لذلك ، تم تخفيض عدد كبير من أشجار Taxus ، مما أدى إلى انقراض قريب لهذه الأنواع الثمينة. بالإضافة إلى ذلك ، فإن Taxus ضعيفة للغاية في الموارد وبطيئة في النمو ، مما يجعل من الصعب على مزيد من التطوير والاستفادة من Taxol.

في الوقت الحاضر ، تم الانتهاء من التوليف الكلي للضبابية بنجاح. ومع ذلك ، فإن طريقها الاصطناعي معقد للغاية وعالي التكلفة ، مما يجعله ليس له أهمية صناعية. أصبحت الطريقة شبه الاصطناعية للضباب ناضجة نسبيًا وتعتبر وسيلة فعالة لتوسيع مصدر Taxol بالإضافة إلى الزراعة الاصطناعية. باختصار ، في شبه توليد الضرائب ، يتم استخراج مركب سلائف الضرائب التي تكون وفيرة نسبيا في مصانع الضرائب ثم يتم تحويلها إلى Taxol عن طريق التوليف الكيميائي. يمكن أن يصل محتوى 10-deacetylbaccatin ⅲ في إبر Taxus Baccata إلى 0.1 ٪. والإبر سهلة لتجديد المقارنة مع اللحاء. لذلك ، فإن التشكيل شبه التضاريس على أساس 10-deacetylbaccatin ⅲ يجذب المزيد والمزيد من الاهتمام من الباحثين [5] (كما هو موضح في الشكل 1).

الشكل 1.

في هذا المنشور ، تم تنقية مستخلص مصنع Taxus بواسطة نظام اللوني السائل التحضيري السائل Sepabean ™ بالاشتراك مع خراطيش فلاش Sepaflash C18 (RP) التي تنتجها Santai Technologies. تم الحصول على المنتج المستهدف الذي يلبي متطلبات النقاء ويمكن استخدامه في البحث العلمي اللاحق ، مما يوفر حلاً فعالًا من حيث التكلفة للتنقية السريعة لهذا النوع من المنتجات الطبيعية.

القسم التجريبي
في هذا المنشور ، تم استخدام مقتطفات Taxus كعينة. تم الحصول على العينة الأولية عن طريق استخراج لحاء Taxus مع الإيثانول. ثم تم إذابة العينة الخام في DMSO وتم تحميلها على خرطوشة الفلاش. يتم سرد الإعداد التجريبي لتنقية الفلاش في الجدول 1.
أداة

أداة

جهاز Sepabean ™

خرطوشة

12 G Sepaflash C18 RP خرطوشة فلاش (السيليكا الكروية ، 20-45μm ، 100 Å ، رقم الطلب : SW-5222-012-SP)

الطول الموجي

254 نانومتر (الكشف) ، 280 نانومتر (مراقبة)

المرحلة المتنقلة

مذيب أ: الماء

المذيبات ب: الميثانول

معدل التدفق

15 مل/دقيقة

تحميل العينة

20 ملغ عينة خام مذاب في 1 مل DMSO

التدرج

الوقت (دقيقة)

المذيبات ب (٪)

0

10

5

10

7

28

14

28

16

40

20

60

27

60

30

72

40

72

43

100

45

100

الجدول 1. الإعداد التجريبي لتنقية الفلاش.

النتائج والمناقشة
تم عرض كروماتوجرام الفلاش للمستخلص الخام من Taxus في الشكل 2. من خلال تحليل الكروماتوجراف والمنتج المستهدف والشوائب التي حققت فصل خط الأساس. علاوة على ذلك ، تم تحقيق استنساخ جيد أيضًا عن طريق حقن عينة متعددة (لا تظهر البيانات). سوف يستغرق الأمر حوالي 4 ساعات لإكمال الفصل في طريقة الكروماتوجرافيا اليدوية مع الأعمدة الزجاجية. مقارنة مع طريقة اللوني اليدوي التقليدي ، تتطلب طريقة التطهير التلقائي في هذا المنشور فقط 44 دقيقة لإكمال مهمة التنقية بأكملها (كما هو موضح في الشكل 3). يمكن حفظ أكثر من 80 ٪ من الوقت وكمية كبيرة من المذيب عن طريق أخذ طريقة تلقائية ، والتي يمكن أن تقلل بشكل فعال من التكلفة وكذلك تحسين كفاءة العمل بشكل كبير.

الشكل 2. كروماتوجراف الفلاش من المستخلص الخام من الضرائب.

الشكل 3. مقارنة طريقة الكروماتوجرافيا اليدوية مع طريقة التطهير التلقائي.
في الختام ، يمكن أن يوفر تمشيط خراطيش فلاش Sepaflash C18 RP مع آلة Sepabean ™ حلاً سريعًا وفعالًا للتنقية السريعة للمنتجات الطبيعية مثل استخراج Taxus.
مراجع

1. Alushin GM ، Lander GC ، Kellogg EH ، Zhang R ، Baker D و Nogales E. تكشف هياكل الأنابيب الدقيقة عالية الدقة عن التحولات الهيكلية في التحلل المائي GTP. Cell ، 2014 ، 157 (5) ، 1117-1129.
2. Burkhart CA ، Berman JW ، Swindell CS و Horwitz SB. العلاقة بين هيكل Taxol و taxanes الأخرى على تحريض عامل نخر الورم α التعبير الجيني والسمية الخلوية. أبحاث السرطان ، 1994 ، 54 (22) ، 5779-5782.
3. Park SJ ، Wu Ch ، Gordon JD ، Zhong X ، Emami A and Safa AR. Taxol يستحث موت الخلايا المبرمج المعتمد على caspase-10 ، J. Biol. Chem. ، 2004 ، 279 ، 51057-51067.
4. باكليتاكسيل. الجمعية الأمريكية للصيدليين للنظام الصحي. [2 يناير 2015]
5. بروس غانم ورولاند ر. فرانك. Paclitaxel من التاكسيات الأولية: منظور حول الاختراع الإبداعي في كيمياء morticozirconium. J. Org. Chem. ، 2007 ، 72 (11) ، 3981-3987.

حول Sepaflash C18 RP خراطيش فلاش

هناك سلسلة من خراطيش فلاش Sepaflash C18 RP مع مواصفات مختلفة من تقنية Santai (كما هو موضح في الجدول 2).

رقم البند

حجم العمود

معدل التدفق

(مل/دقيقة)

max.pressure

(PSI/BAR)

SW-5222-004-SP

5.4 جم

5-15

400/27.5

SW-5222-012-SP

20 غرام

10-25

400/27.5

SW-5222-025-SP

33 جم

10-25

400/27.5

SW-5222-040-SP

48 جم

15-30

400/27.5

SW-5222-080-SP

105 غرام

25-50

350/24.0

SW-5222-120-SP

155 جم

30-60

300/20.7

SW-5222-220-SP

300 جم

40-80

300/20.7

SW-5222-330-SP

420 جم

40-80

250/17.2

الجدول 2. Sepaflash C18 RP فلاش خراطيش.
مواد التعبئة: السيليكا الكروية العالية الكفاءة C18 ، 20-45 ميكرون ، 100 Å

لمزيد من المعلومات حول المواصفات التفصيلية لآلة Sepabean ™ ، أو معلومات الطلب على خراطيش فلاش Sepaflash Series ، يرجى زيارة موقعنا على الويب


وقت النشر: SEP-20-2018