لافتة الأخبار

أخبار

تنقية الشوائب الشديدة القطبية في المضادات الحيوية بواسطة أعمدة C18AQ

تنقية الشوائب الشديدة القطبية في المضادات الحيوية بواسطة أعمدة C18AQ

مينغزو يانغ ، بو شو
تطبيق R&D Center

مقدمة
المضادات الحيوية هي فئة من المستقلبات الثانوية التي تنتجها الكائنات الحية الدقيقة (بما في ذلك البكتيريا ، والفطريات ، أو الأكتينيسيت) أو المركبات المماثلة التي يتم تصنيعها كيميائيًا أو شبه محددة. يمكن أن تمنع المضادات الحيوية نمو وبقاء الكائنات الحية الدقيقة الأخرى. تم اكتشاف أول مضاد حيوي اكتشفه الإنسان ، البنسلين ، من قبل عالم الأحياء المجهرية البريطانية ألكساندر فليمنج في عام 1928. لاحظ أن البكتيريا الموجودة في محيط القالب لا يمكن أن تنمو في طبق ثقافة المكورات العنقودية التي كانت ملوثة بالعفن. افترض أن القالب يجب أن يفرز مادة مضادة للبكتيريا ، أطلق عليها اسم البنسلين في عام 1928. ومع ذلك ، لم يتم تنقية المكونات النشطة في ذلك الوقت. في عام 1939 ، قررت سلسلة إرنست وهيارد فليري من جامعة أكسفورد تطوير دواء يمكن أن يعالج الالتهابات البكتيرية. بعد الاتصال بـ Fleming للحصول على سلالات ، نجحوا في استخراج البنسلين ونقيته من السلالات. من أجل تطورهم الناجح للبنسلين كدواء علاجي ، شارك فليمنج وسلسلة وفلوري جائزة نوبل عام 1945 في الطب.

يتم استخدام المضادات الحيوية كعوامل مضادة للبكتيريا لعلاج أو منع الالتهابات البكتيرية. هناك العديد من الفئات الرئيسية من المضادات الحيوية المستخدمة كعوامل مضادة للبكتيريا: المضادات الحيوية β-lactam (بما في ذلك البنسلين ، السيفالوسبورين ، إلخ) ، المضادات الحيوية للأمينوغليكوسيد ، المضادات الحيوية الماكروليد ، والمضادات الحيوية التتراسيكلين ، كلورامفينيكول (المضادات المليئة) ، وما إلى ذلك. شبه التوليف والتوليف الكلي. يجب تعديل المضادات الحيوية الناتجة عن التخمير البيولوجي من الناحية الهيكلية بالطرق الكيميائية بسبب الاستقرار الكيميائي ، والآثار الجانبية السامة ، والطيف المضاد للبكتيريا وغيرها من القضايا. بعد تعديلها كيميائيًا ، يمكن للمضادات الحيوية أن تحقق زيادة في الاستقرار ، وتقلل من الآثار الجانبية السامة ، والطيف المضاد للبكتيريا الموسع ، وتقليل مقاومة الأدوية ، وتحسين التوافر البيولوجي ، وبالتالي تحسين تأثير العلاج بالمخدرات. لذلك ، تعد المضادات الحيوية شبه الخاطئة هي الاتجاه الأكثر شعبية في تطوير الأدوية المضادة الحيوية.

في تطور المضادات الحيوية شبه الخاطئة ، يكون للمضادات الحيوية خصائص نقاء منخفضة ، والكثير من المنتجات الثانوية والمكونات المعقدة لأنها مستمدة من منتجات التخمير الميكروبية. في هذه الحالة ، يعد تحليل الشوائب والسيطرة عليها في المضادات الحيوية شبه الخاطئة ذات أهمية خاصة. من أجل تحديد وتوصيف الشوائب بشكل فعال ، من الضروري الحصول على كمية كافية من الشوائب من المنتج الاصطناعي للمضادات الحيوية شبه التوافقية. من بين تقنيات تحضير الشوائب الشائعة الاستخدام ، يعد كروماتوجرافيا الفلاش طريقة فعالة من حيث التكلفة مع مزايا مثل مبلغ تحميل العينة الكبير ، والتكلفة المنخفضة ، وتوفير الوقت ، وما إلى ذلك.

في هذا المنشور ، تم استخدام الشوائب الرئيسية لمضادات حيوية الأمينوغليكوسيد شبه الخاطئة كعينة وتنقيتها بواسطة خرطوشة Sepaflash C18AQ مع آلة Sepabean ™ Sepabean System. تم الحصول على المنتج المستهدف الذي يفي بالمتطلبات بنجاح ، مما يشير إلى حل عالي الكفاءة لتنقية هذه المركبات.

القسم التجريبي
تم توفير العينة من قبل شركة الأدوية المحلية. كانت العينة نوعًا من الكربوهيدرات الأمينية متعددة الحلقات وكان بنيتها الجزيئية متشابهة مع المضادات الحيوية للأمينوغليكوزيد. كانت قطبية العينة عالية إلى حد ما ، مما يجعلها قابلة للذوبان في الماء. تم عرض الرسم التخطيطي للبنية الجزيئية للعينة في الشكل 1. كان نقاء العينة الخام حوالي 88 ٪ كما تم تحليله بواسطة HPLC. لتنقية هذه المركبات ذات القطبية العالية ، سيتم الاحتفاظ بالعينة بالكاد على أعمدة C18 العادية وفقًا لتجاربنا السابقة. لذلك ، تم استخدام عمود C18AQ لتنقية العينة.

الشكل 1. الرسم التخطيطي للبنية الجزيئية للعينة.
لإعداد محلول العينة ، تم إذابة عينة خام 50 ملغ في ماء نقي 5 مل ثم الموجات فوق الصوتية من أجل جعلها حل واضح تمامًا. ثم تم حقن محلول العينة في عمود الفلاش بواسطة حاقن. تم سرد الإعداد التجريبي لتنقية الفلاش في الجدول 1.

أداة

جهاز Sepabean ™ 2

خراطيش

12 G Sepaflash C18AQ RP Flash Cartridge (السيليكا الكروية ، 20-45μm ، 100 Å ، رقم الطلب : SW-5222-012-SP (AQ))

الطول الموجي

204 نانومتر ، 220 نانومتر

المرحلة المتنقلة

مذيب أ: الماء

المذيبات ب: أسيتونيتريل

معدل التدفق

15 مل/دقيقة

تحميل العينة

50 ملغ

التدرج

الوقت (دقيقة)

المذيبات ب (٪)

0

0

19.0

8

47.0

80

52.0

80

النتائج والمناقشة
تم عرض كروماتوجرام الفلاش للعينة على خرطوشة C18AQ في الشكل 2. كما هو مبين في الشكل 2 ، تم الاحتفاظ بالعينة القطبية عالية بشكل فعال على خرطوشة C18AQ. بعد التجويف للكسور التي تم جمعها ، كان للمنتج المستهدف نقاءًا قدره 96.2 ٪ (كما هو مبين في الشكل 3) بواسطة تحليل HPLC. أشارت النتائج إلى أنه يمكن استخدام المنتج المنقى في الخطوة التالية البحث والتطوير.

الشكل 2. كروماتوجرام الفلاش للعينة على خرطوشة C18AQ.

الشكل 3. كروماتوجراف HPLC للمنتج المستهدف.

في الختام ، يمكن أن توفر خرطوشة فلاش Sepaflash C18AQ RP جنبًا إلى جنب مع آلة فلاش كروماتوجرافيا Sepabean ™ حلاً سريعًا وفعالًا لتنقية العينات القطبية للغاية.

حول Sepaflash C18AQ RP خراطيش فلاش
هناك سلسلة من خراطيش فلاش Sepaflash C18AQ RP مع مواصفات مختلفة من تقنية Santai (كما هو موضح في الجدول 2).

رقم البند

حجم العمود

معدل التدفق

(مل/دقيقة)

max.pressure

(PSI/BAR)

SW-5222-004-SP (AQ)

5.4 جم

5-15

400/27.5

SW-5222-012-SP (AQ)

20 غرام

10-25

400/27.5

SW-5222-025-SP (AQ)

33 جم

10-25

400/27.5

SW-5222-040-SP (AQ)

48 جم

15-30

400/27.5

SW-5222-080-SP (AQ)

105 غرام

25-50

350/24.0

SW-5222-120-SP (AQ)

155 جم

30-60

300/20.7

SW-5222-220-SP (AQ)

300 جم

40-80

300/20.7

SW-5222-330-SP (AQ)

420 جم

40-80

250/17.2

الجدول 2. Sepaflash C18AQ RP خراطيش فلاش. مواد التعبئة: C18 كروية عالية الكفاءة C18 (AQ)-السيليكا الموند ، 20-45 ميكرون ، 100 Å.

لمزيد من المعلومات حول المواصفات التفصيلية لآلة Sepabean ™ ، أو معلومات الطلب على خراطيش فلاش Sepaflash Series ، يرجى زيارة موقعنا على الويب.


وقت النشر: أكتوبر -26-2018