Nuusbanier

Nuus

Die suiwering van Taxus -uittreksel deur Sepabean ™ -masjien

Taxus -uittreksel

Meiyuan Qian, Yuefeng Tan, Bo Xu
Toepassing R & D -sentrum

Bekendstelling
Taxus (Taxus chinensis of Chinese taxus) is 'n wilde plant wat deur die land beskerm word. Dit is 'n seldsame en bedreigde plant wat deur die kwaternêre gletsers agterbly. Dit is ook die enigste natuurlike medisinale plant ter wêreld. Taxus word versprei in die gematigde gebied van die noordelike halfrond na die middel-subtropiese streek, met ongeveer 11 spesies ter wêreld. Daar is 4 spesies en 1 variëteit in China, naamlik Noordoostelike Taxus, Yunnan Taxus, Taxus, Tibetaanse Taxus en Southern Taxus. Hierdie vyf spesies word in die suidweste van China, Suid -China, Sentraal -China, Oos -China, Noordwes -China, Noordoos -China en Taiwan versprei. Taxus -aanlegte bevat 'n groot verskeidenheid chemiese komponente, insluitend taxane, flavonoïede, lignans, steroïede, fenolsure, sesquiterpenes en glikosiede. Die beroemde taxol teen tumor (of paslitaksel) is 'n soort taxane. Taxol het unieke antikankmeganismes. Taxol kan mikrotubules "vries" deur met hulle te bestry en te voorkom dat mikrotubules chromosome skei ten tyde van die seldeling, wat lei tot die dood van die verdeel van selle, veral vinnig om kankerselle te versprei [1]. Deur makrofage te aktiveer, veroorsaak Taxol 'n afname in TNF-α (tumor nekrose faktor) reseptore en die vrystelling van TNF-α, waardeur tumorselle doodmaak of belemmer word [2]. Boonop kan Taxol apoptose veroorsaak deur op die apoptotiese reseptorweg te werk wat deur FAS/FASL bemiddel word of die cysteïne -protease -stelsel aktiveer [3]. As gevolg van die veelvuldige teiken-kanker-effek, word Taxol wyd gebruik in die behandeling van eierstokkanker, borskanker, nie-kleinselle-longkanker (NSCLC), maagkanker, slukdermkanker, blaaskanker, prostaatkanker, kwaadaardige melanoom, kop- en nekkanker, ens. [4] Veral vir gevorderde borskanker en gevorderde eierstokkanker het Taxol 'n uitstekende genesende effek, daarom staan ​​dit bekend as “die laaste verdedigingslinie vir kankerbehandeling”.

Taxol is die gewildste teenkanker -medisyne in die internasionale mark die afgelope jaar en word beskou as een van die doeltreffendste medisyne teen kanker vir mense in die volgende 20 jaar. In onlangse jare, met die plofbare groei van bevolkings- en kankervoorval, het die vraag na taxol ook aansienlik toegeneem. Taxol word tans nodig vir kliniese of wetenskaplike navorsing wat hoofsaaklik direk uit taxus onttrek word. Ongelukkig is die inhoud van taxol in plante redelik laag. Die Taxol -inhoud is byvoorbeeld slegs 0,069% in die bas van Taxus brevifolia, wat oor die algemeen beskou word as die hoogste inhoud. Vir die onttrekking van 1 g taxol, vereis dit ongeveer 13,6 kg taxus bas. Op grond van hierdie skatting neem dit 3 - 12 taksbome wat meer as 100 jaar oud is om 'n eierstokkanker te behandel. Gevolglik is 'n groot aantal taksbome afgekap, wat gelei het tot byna uitwissing vir hierdie kosbare spesie. Daarbenewens is Taxus baie swak in hulpbronne en is dit stadig in groei, wat dit moeilik maak vir verdere ontwikkeling en gebruik van taxol.

Op die oomblik is die totale sintese van Taxol suksesvol voltooi. Die sintetiese roete is egter baie ingewikkeld en van hoë koste, waardeur dit geen industriële belang het nie. Die semi-sintetiese metode van Taxol is nou relatief volwasse en word beskou as 'n effektiewe manier om die bron van taxol bykomend tot kunsmatige aanplanting uit te brei. Kortliks, in die semi-sintese van Taxol, word die Taxol-voorloperverbinding wat relatief volop by Taxus-aanlegte is, onttrek en dan deur chemiese sintese in taxol omgeskakel. Die inhoud van 10-deacetylbaccatin ⅲ in die naalde van Taxus baccata kan tot 0,1%wees. En die naalde is maklik om te regenereer in vergelyking met die blaf. Daarom trek die semi-sintese van taxol gebaseer op 10-deacetylbaccatin ⅲ al hoe meer aandag van navorsers [5] (soos getoon in Figuur 1).

Figuur 1. Die semi-sintetiese roete van Taxol gebaseer op 10-deacetylbaccatin ⅲ.

In hierdie pos is die Taxus Plant Extract gesuiwer deur 'n flitsvoorbereidende vloeistofchromatografie-stelsel Sepabean ™ -masjien in kombinasie met SepaFLash C18 omgekeerde fase (RP) flitspatrone wat deur Santai Technologies geproduseer is. Die teikenproduk wat aan die suiwerheidsvereistes voldoen, is verkry en kan in daaropvolgende wetenskaplike navorsing gebruik word, wat 'n koste-effektiewe oplossing bied vir die vinnige suiwering van hierdie soort natuurlike produkte.

Eksperimentele afdeling
In hierdie pos is die Taxus -uittreksels as monster gebruik. Die rou monster is verkry deur die taxusbas met etanol te onttrek. Daarna is die rou monster in DMSO opgelos en op die flitspatroon gelaai. Die eksperimentele opstelling van die flitssuiwering word in Tabel 1 gelys.
Instrument

Instrument

Sepabean ™ -masjien

Patroon

12 G Sepaflash C18 RP-flitspatroon (sferiese silika, 20-45μm, 100 Å, bestelnommer : SW-5222-012-SP)

Golflengte

254 nm (opsporing), 280 nm (monitering)

Mobiele fase

Oplosmiddel A: Water

Oplosmiddel B: metanol

Vloeitempo

15 ml/min

Monster laai

20 mg rou monster opgelos in 1 ml DMSO

Gradiënt

Tyd (min)

Oplosmiddel B (%)

0

10

5

10

7

28

14

28

16

40

20

60

27

60

30

72

40

72

43

100

45

100

Tabel 1. Die eksperimentele opstelling vir flitssuiwering.

Resultate en bespreking
Die flitschromatogram vir die ru -uittreksel van taksus is in Figuur 2 getoon deur die chromatogram, die teikenproduk en die onsuiwerhede te ontleed wat die basisskeiding bereik het. Verder is goeie reproduceerbaarheid ook gerealiseer deur veelvuldige monsterinspuitings (data word nie getoon nie). Dit sal ongeveer 4 uur neem om die skeiding in handmatige chromatografie -metode met glaskolomme te voltooi. In vergelyking met die tradisionele handchromatografie -metode, benodig die outomatiese suiweringsmetode in hierdie pos slegs 44 minute om die hele suiweringstaak te voltooi (soos getoon in Figuur 3). Meer as 80% van die tyd en 'n groot hoeveelheid oplosmiddel kan gestoor word deur outomatiese metode te neem, wat die koste effektief kan verlaag en die werkdoeltreffendheid aansienlik kan verbeter.

Figuur 2. Die flitschromatogram van ru -uittreksel uit Taxus.

Figuur 3. Die vergelyking van die handchromatografiese metode met 'n outomatiese suiweringsmetode.
Ten slotte kan die kombinasie van SepaFlash C18 RP -flitspatrone met Sepabean ™ -masjien 'n vinnige en doeltreffende oplossing bied vir die vinnige suiwering van natuurlike produkte soos taxus -uittreksel.
Verwysings

1. Alushin GM, Lander GC, Kellogg EH, Zhang R, Baker D en Nogales E. Hoë-resolusie mikrotubule-strukture onthul die strukturele oorgange in αβ-tubulien by GTP-hidrolise. Cell, 2014, 157 (5), 1117-1129.
2. Burkhart CA, Berman JW, Swindell CS en Horwitz SB. Verhouding tussen die struktuur van taxol en ander taxane op induksie van tumor nekrose faktor-α geenuitdrukking en sitotoksisiteit. Kankernavorsing, 1994, 54 (22), 5779-5782.
3. Park SJ, Wu CH, Gordon JD, Zhong X, Emami A en Safa AR. Taxol veroorsaak caspase-10-afhanklike apoptose, J. Biol. Chem., 2004, 279, 51057-51067.
4. Paclitaxel. Die American Society of Health-System Aptekers. [2 Januarie 2015]
5. Bruce Ganem en Roland R. Franke. Paclitaxel van primêre taxane: 'n perspektief op kreatiewe uitvinding in organozirconiumchemie. J. org. Chem., 2007, 72 (11), 3981-3987.

Oor die Sepaflash C18 RP -flitspatrone

Daar is 'n reeks van die Sepaflash C18 RP -flitspatrone met verskillende spesifikasies van Santai -tegnologie (soos aangetoon in Tabel 2).

Itemnommer

Kolomgrootte

Vloeitempo

(ML/min)

Max.pressure

(PSI/balk)

SW-5222-004-SP

5,4 g

5-15

400/27.5

SW-5222-012-SP

20 g

10-25

400/27.5

SW-5222-025-SP

33 g

10-25

400/27.5

SW-5222-040-SP

48 g

15-30

400/27.5

SW-5222-080-SP

105 g

25-50

350/24.0

SW-5222-120-SP

155 g

30-60

300/20.7

SW-5222-220-SP

300 g

40-80

300/20.7

SW-5222-330-SP

420 g

40-80

250/17.2

Tabel 2. Sepaflash C18 RP Flash Cartridges.
Verpakkingmateriaal: Sferiese C18-gebonde silika met 'n hoë doeltreffendheid, 20-45 μm, 100 Å

Besoek ons ​​webwerf vir meer inligting oor die gedetailleerde spesifikasies van die Sepabean ™ -masjien, of die bestelinligting oor die sepaflash -reeks Flash Cartridges, besoek ons ​​webwerf


Postyd: Sep-20-2018