Mingzu Yang, Bo Xu
Toepassing R & D -sentrum
Bekendstelling
Antibiotika is 'n klas sekondêre metaboliete wat deur mikroörganismes geproduseer word (insluitend bakterieë, swamme, actinomycetes) of soortgelyke verbindings wat chemies gesintetiseer of semi-gesintetiseer is. Antibiotika kan die groei en oorlewing van ander mikroörganismes belemmer. Die eerste antibiotikum wat deur die mens, Penicillin, ontdek is, is in 1928 deur die Britse mikrobioloog Alexander Fleming ontdek. Hy het opgemerk dat die bakterieë in die omgewing van die vorm nie kon groei in die Staphylococcus -kultuurgereg wat met vorm besmet was nie. Hy het gesê dat die vorm 'n antibakteriese stof moet afskei, wat hy in 1928 penicillien genoem het. Die aktiewe bestanddele is egter nie destyds gesuiwer nie. In 1939 het Ernst Chain en Howard Florey van die Universiteit van Oxford besluit om 'n middel te ontwikkel wat bakteriële infeksies kan behandel. Nadat hulle Fleming gekontak het om stamme te verkry, het hulle penisillien suksesvol uit die stamme onttrek en gesuiwer. Vir hul suksesvolle ontwikkeling van penicillien as terapeutiese middel, het Fleming, Chain en Florey die Nobelprys vir medisyne in 1945 gedeel.
Antibiotika word as antibakteriese middels gebruik om bakteriële infeksies te behandel of te voorkom. Daar is verskillende hoofkategorieë van antibiotika wat as antibakteriese middels gebruik word: ß-laktam antibiotika (insluitend penisillien, kefalosporien, ens.), Aminoglycoside antibiotika, makroliedantibiotika, tetrasiklien antibiotika, chlooramfenika (totale sintetiese antibiotiese), ens. Semi-sintese en totale sintese. Die antibiotika wat deur biologiese fermentasie geproduseer word, moet struktureel deur chemiese metodes gewysig word as gevolg van chemiese stabiliteit, giftige newe -effekte, antibakteriese spektrum en ander probleme. Nadat die antibiotika chemies gemodifiseer is, kan die antibiotika verhoogde stabiliteit bereik, giftige newe -effekte verminder, antibakteriese spektrum uitgebrei word, medisyne -weerstandigheid verminder, die biobeskikbaarheid verbeter en sodoende die effek van geneesmiddelbehandeling verbeter. Daarom is semi-sintetiese antibiotika tans die gewildste rigting in die ontwikkeling van antibiotiese middels.
In die ontwikkeling van semi-sintetiese antibiotika het antibiotika die eienskappe van lae suiwerheid, baie neweprodukte en komplekse komponente, aangesien dit afgelei is van mikrobiese fermentasieprodukte. In hierdie geval is die ontleding en beheer van onsuiwerhede in semi-sintetiese antibiotika veral belangrik. Om onsuiwerhede effektief te identifiseer en te karakteriseer, is dit nodig om 'n voldoende hoeveelheid onsuiwerhede van die sintetiese produk van semi-sintetiese antibiotika te verkry. Van die algemeen gebruikte onreinheidsvoorbereidingstegnieke, is flitschromatografie 'n koste-effektiewe metode met voordele soos groot monsterlading, lae koste, tydbesparing, ens. Flitschromatografie is al hoe meer deur sintetiese navorsers gebruik.
In hierdie pos is die belangrikste onreinheid van 'n semi-sintetiese aminoglikosied-antibiotikum as die monster gebruik en gesuiwer deur 'n SepaFLash C18AQ-patroon gekombineer met die flitschromatografiestelsel Sepabean ™ -masjien. Die teikenproduk wat aan die vereistes voldoen, is suksesvol verkry, wat dui op 'n baie doeltreffende oplossing vir die suiwering van hierdie verbindings.
Eksperimentele afdeling
Die steekproef is vriendelik deur 'n plaaslike farmaseutiese onderneming voorsien. Die monster was 'n soort amino -polisikliese koolhidrate en die molekulêre struktuur was soortgelyk met aminoglikosiedantibiotika. Die polariteit van die monster was taamlik hoog, wat dit baie oplosbaar in water gemaak het. Die skematiese diagram van die molekulêre struktuur van die monster is in Figuur 1 getoon. Die suiwerheid van die rou monster was ongeveer 88% soos geanaliseer deur HPLC. Vir die suiwering van hierdie verbindings van hoë polariteit, sou die monster skaars op die gewone C18 -kolomme behou word volgens ons vorige ervarings. Daarom is 'n C18AQ -kolom gebruik vir die monsteruiwering.
Figuur 1. Die skematiese diagram van die molekulêre struktuur van die monster.
Om die monsteroplossing voor te berei, is 50 mg ru -monster in 5 ml suiwer water opgelos en daarna ultrasoniseer om dit 'n duidelike oplossing te maak. Die monsteroplossing is daarna deur 'n inspuiter in die flitskolom ingespuit. Die eksperimentele opstelling van die flitssuiwering is in die Tabel 1 gelys.
| Instrument | Sepabean ™ Machine 2 | |
| Cartridges | 12 G Sepaflash C18AQ RP-flitspatroon (sferiese silika, 20-45μm, 100 Å, bestelnommer ： SW-5222-012-SP (aq)) | |
| Golflengte | 204 nm, 220 nm | |
| Mobiele fase | Oplosmiddel A: Water Oplosmiddel B: asetonitril | |
| Vloeitempo | 15 ml/min | |
| Monster laai | 50 mg | |
| Gradiënt | Tyd (min) | Oplosmiddel B (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47.0 | 80 | |
| 52.0 | 80 | |
Resultate en bespreking
Die flitchromatogram van die monster op die C18AQ -patroon is in Figuur 2 getoon. Soos getoon in Figuur 2, is die hoogs poolmonster effektief op die C18AQ -patroon behou. Na lyofolisering vir die versamelde breuke, het die teikenproduk 'n suiwerheid van 96,2% (soos getoon in Figuur 3) deur HPLC -analise. Die resultate het aangedui dat die gesuiwerde produk verder in die volgende stap -navorsing en ontwikkeling gebruik kan word.
Figuur 2. Die flitschromatogram van die monster op 'n C18AQ -patroon.
Figuur 3. Die HPLC -chromatogram van die teikenproduk.
Ter afsluiting kan SepaFlash C18AQ RP -flitspatroon gekombineer met die Flashchromatography System Sepabean ™ -masjien 'n vinnige en effektiewe oplossing bied vir die suiwering van hoogs poolmonsters.
Oor die Sepaflash C18AQ RP -flitspatrone
Daar is 'n reeks van die Sepaflash C18AQ RP -flitspatrone met verskillende spesifikasies van Santai -tegnologie (soos aangetoon in Tabel 2).
| Itemnommer | Kolomgrootte | Vloeitempo (ML/min) | Max.pressure (PSI/balk) |
| SW-5222-004-SP (AQ) | 5,4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP (AQ) | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP (AQ) | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP (AQ) | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP (AQ) | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP (AQ) | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP (AQ) | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
Tabel 2. Sepaflash C18AQ RP -flitspatrone. Verpakkingmateriaal: Sferiese C18 (AQ) -gebonde silika, 20-45 μm, 100 Å.
Besoek ons webwerf vir meer inligting oor die gedetailleerde spesifikasies van die Sepabean ™ -masjien, of die bestelinligting oor die SepaFlash -reeks Flash Cartridges.
Postyd: Okt-26-2018